[发明专利]一种新金色分枝杆菌突变株及其在制备HIP的应用有效
申请号: | 201810744531.X | 申请日: | 2018-07-09 |
公开(公告)号: | CN109251870B | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
发明(设计)人: | 张驰;彭金金 | 申请(专利权)人: | 沈阳博泰生物制药有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P7/40;C12R1/32 |
代理公司: | 北京瑞恒信达知识产权代理事务所(普通合伙) 11382 | 代理人: | 张伟 |
地址: | 110027 辽宁省沈阳*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 金色 分枝杆菌 突变 及其 制备 hip 应用 | ||
1.一种新金色分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum)突变株MN PJ-5,保藏编号为CGMCCNo.15575。
2.权利要求1所述的新金色分枝杆菌突变株MN PJ-5的种子培养物。
3.根据权利要求2所述的种子培养物,其特征在于,所述种子培养物通过培养权利要求1所述的新金色分枝杆菌突变株MN PJ-5制备得到。
4.根据权利要求3所述的种子培养物,其特征在于,所述种子培养物通过包括以下步骤的培养方法制备得到:
将所述新金色分枝杆菌突变株MN PJ-5接种于种子培养基,振荡培养,所述种子培养基包含:牛肉膏0.1~0.5g/L,蛋白胨0.5~1.5g/L,酵母粉0.2~0.4g/L,甘油1.0~2.0g/L,吐温1.5~2.5g/L,pH 7.0~7.4。
5.根据权利要求4所述的种子培养物,其特征在于,所述种子培养基包含:牛肉膏0.3g/L,蛋白胨1.0g/L,酵母粉0.3g/L,甘油1.5g/L,吐温2.0g/L,pH7.2。
6.根据权利要求4或5所述的种子培养物,其特征在于,所述种子培养物通过包括以下步骤的培养方法制备得到:
将所述新金色分枝杆菌突变株MN PJ-5接种于所述种子培养基,在28~32℃下,以200~250转/分钟振荡培养36~60小时。
7.根据权利要求6所述的种子培养物,其特征在于,在32℃下振荡培养。
8.根据权利要求7所述的种子培养物,其特征在于,以220转/分钟振荡培养。
9.根据权利要求8所述的种子培养物,其特征在于,振荡培养48小时。
10.权利要求1所述的新金色分枝杆菌突变株MN PJ-5或权利要求2至9中任一项所述的种子培养物在制备HIP中的用途。
11.一种制备HIP的方法,所述方法包括使用权利要求1所述的新金色分枝杆菌突变株MN PJ-5或权利要求2至9中任一项所述的种子培养物将植物甾醇转化为HIP。
12.根据权利要求11所述的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)将权利要求1所述的新金色分枝杆菌突变株MN PJ-5或权利要求2至9中任一项所述的种子培养物接种于包含植物甾醇的转化培养基中进行发酵培养;
(2)从步骤(1)得到的发酵培养液中提取HIP。
13.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述转化培养基包含:大豆蛋白胨1~5g/L,酵母提取物0.5~2g/L,葡萄糖0.5~2g/L,柠檬酸0.1~0.3g/L,柠檬酸铁铵0.01~0.05g/L,K2HPO4 0.5~1.5g/L,MgSO4·7H2O 0.01~0.1g/L,NH4NO3 0.1~0.5g/L,吐温80 1~5g/L,植物甾醇8.5~85g/L,pH 7.0-7.6。
14.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,所述转化培养基包含:大豆蛋白胨3g/L,酵母提取物1g/L,葡萄糖1.0g/L,柠檬酸0.2g/L,柠檬酸铁铵0.01g/L,K2HPO4 1.0g/L,MgSO4·7H2O 0.05g/L,NH4NO3 0.3g/L,吐温80 2g/L,植物甾醇8.5-85g/L,pH 7.2。
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