[发明专利]鉴别或辅助鉴别黄芪的方法有效
申请号: | 201810745818.4 | 申请日: | 2018-07-09 |
公开(公告)号: | CN109735609B | 公开(公告)日: | 2022-02-15 |
发明(设计)人: | 王继永;郑司浩;曾燕;尚兴朴;刘美娟;李进瞳;史玉宝 | 申请(专利权)人: | 中国中药有限公司;国药种业有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869 |
代理公司: | 北京知联天下知识产权代理事务所(普通合伙) 11594 | 代理人: | 王冲;吴鑫 |
地址: | 102600 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴别 辅助 黄芪 方法 | ||
1.一种基于单核苷酸多态性标记的鉴别或辅助鉴别黄芪的方法,其包括以下步骤:
1) 提取待测黄芪的DNA作为模板;
2)加入ITS序列的引物对对模板进行PCR扩增,所述引物对序列分别如SEQ ID NO: 9和SEQ ID NO: 10所示,获得扩增产物,然后对扩增产物进行测序,若核基因序列ITS第476位点为T碱基,则该待测黄芪是膜荚黄芪,若核基因序列ITS第476位点为C碱基,则该待测黄芪是蒙古黄芪。
2.根据权利要求1所述的方法,还含有以下步骤:加入引物对对模板进行PCR扩增,获得扩增产物,然后对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳;所述引物对选自引物对1、引物对2和引物对3中的任意一种,其中,引物对1的序列如SEQ ID NO: 1 和SEQ ID NO: 2所示,引物对2的序列如SEQ ID NO: 3 和SEQ ID NO: 4 所示,引物对3的序列如SEQ ID NO: 5 和SEQ IDNO: 6 所示。
3.根据权利要求2所述的方法,其中通过琼脂糖凝胶电泳来检测所述扩增产物,若电泳显示出扩增条带,则表明该待测黄芪是蒙古黄芪。
4.根据权利要求3所述的方法,其中所述的扩增条带的分子量是400bp。
5.根据权利要求1-2中任一种所述的方法,其中所述的DNA提取方法是CTAB法。
6.根据权利要求1-2中任一种所述的方法,其中所述的DNA提取时的缓冲液是异丙醇。
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