[发明专利]一种从牛蒡中分离或分析酚酸类化合物的方法

说明书

本发明公开了一种从牛蒡中分离或分析酚酸类化合物的方法，其包括高效液相色谱仪‑离子迁移谱仪联用的过程，所述离子迁移谱仪为电喷雾‑离子迁移谱仪。本发明可快速分离或分析牛蒡中酚酸类化合物成分，为牛蒡新药开发提供了应用基础。

技术领域

本发明涉及从牛蒡中进行活性成分分离的技术领域。

背景技术

牛蒡A.Lappa L.为菊科多年生草本植物，为长日照植物，虽生 长于温暖气候条件，也有耐寒耐热的特性。其一般花期为6-8月，果 期为8-10月。在我国的种植产地包括山东、江苏、台湾、陕西、河 南、湖北、安徽、浙江等地。不仅可作为强身健体的高档蔬菜被人们所食用，还可以入药、造酒、成为保健品。

牛蒡中含有多种活性成分，如挥发油、多酚类、多炔类、硫炔类、 多糖类等。牛蒡中的含有的酚酸类成分如今越来越得到人们关注，研 究证明具有抗氧化、抗炎、抗癌、抗菌等生理活性作用。

现有技术中有多种分离和分析酚酸类化合物的方法，但通常具有 明显的缺点，如耗时太久、酚酸物质衍生过程不稳定等。

发明内容

本发明的目的在于提出一种能有效地、稳定地从牛蒡中分离或/ 和分析酚酸类化合物的方法，其包括以下技术方案：

一种从牛蒡中分离或分析酚酸类化合物的方法，其包括高效液相 色谱仪-离子迁移谱仪联用的过程，所述离子迁移谱仪为电喷雾-离子 迁移谱仪。

经发明人分析发现，牛蒡中的酚酸类化合物主要包括以下8种： 3,4-二羟基苯甲酸、2,5-二羟基苯甲酸、反-对香豆酸、阔马酸、香 草酸、咖啡酸、反-阿魏酸、芥子酸。

发明人进一步发现在单独使用高效液相色谱(HPLC)对牛蒡中的 酚酸类成分进行分离和检测时，尽管优化了HPLC的色谱条件，不同 的酚酸类物质仍然难以完全分开。

如其在一种具体的实施例中，单独使用HPLC时，得到的谱图中 香草酸和咖啡酸，反-阿魏酸和芥子酸分别合并出峰。

而在将HPLC与离子迁移谱(IMS)联用后，可有效将这8种成分 进行分离。

可以理解的是，尽管发明人在此认为本方法可用于分离或分析牛 蒡中的酚酸类化合物，其同时也显然可用于分离和分析一并进行的过 程。

如在一种具体实施例中，离子迁移区的长度为16.8cm，离子门 电压为9043V，迁移区温度为393K，迁移谱内部压强为9.024kPa， 结合其在离子迁移谱中形成的离子峰的迁移时间，通过约化迁移率公 式：

可计算出阔马酸、3,4-二羟基苯甲酸、2,5-二羟基苯甲酸、反- 对香豆酸、香草酸、咖啡酸、反-阿魏酸、芥子酸的约化迁移率分别 为：1.34、1.31、1.29、1.22、1.22、1.18、1.11、1.03cm²V^-1s^-1。

发明人发现仅进行简单的分离或/和检测分析时，所述离子迁移 谱仪可选择信号平均法、傅里叶变换法、相关分析法等多种方法进行 分析。

发明人进一步发现其中优选的是所述离子迁移谱仪使用相关离 子迁移谱，即Correlation IMS，或CIMS。

如在一种具体的实施例中，发明人采用信号平均法(SA)及相关 分析法(CIMS)对比发现，CIMS的信噪比平均为SA的5倍以上。

在一种具体的实施方式中，其中所述高效液相色谱仪，包括如下 的色谱条件：使用C18柱，流动相包括含有第一有机试剂和水的流动 相A，及含有第二有机试剂的流动相B，并进行梯度洗脱，其中所述 第一有机试剂选自甲酸或乙酸，优选为甲酸，优选为流动相A中第一 有机试剂的体积含量为0.05～0.15％，第二有机试剂选自甲醇或乙腈， 优选为甲醇。