[发明专利]一种检测CYP3A4、CYP3A5多态性位点的试剂盒及其方法有效
| 申请号： | 201810747931.6 | 申请日： | 2018-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN108410961B | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 唐荣;苏丽;吴丹 | 申请（专利权）人： | 默禾医疗科技（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京成实知识产权代理有限公司 11724 | 代理人： | 张焱 |
| 地址： | 200120 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多态性位点 试剂盒 荧光探针序列 引物序列 芬太尼 种检测 试剂盒应用 代谢能力 待测对象 结果分析 可重复性 临床应用 特异性强 灵敏度 防污染 吻合度 有效地 检测 诊断 | ||
1.一种检测CYP3A4、CYP3A5多态性位点的试剂盒，该试剂盒包括引物，特异性TaqMan双荧光探针和PCR扩增试剂，其中检测试剂盒分成两组：
A组
用于检测位点CYP3A4*1G的引物序列：
SEQ1：5'CAGAGCCTTCCTACATAGAG 3'；
SEQ2：5'GGCCCAATCAATTATCTTTA 3'；
用于检测位点CYP3A4*1G的探针序列：
SEQ3：5'FAM-TCTCCATGTACCATCCACTC-3'MGB；
SEQ4：5'VIC-TCTCCATGTATCATCCACTC-3'MGB；
用于检测位点CYP3A5*3的引物序列：
SEQ5：5'AGAGTGGCATAGGAGATACC 3'；
SEQ6：5'GTGTGACACACAGCAAGAGT 3'；
用于检测位点CYP3A5*3的探针序列：
SEQ7：5'FAM-TTGTCTTTCAATATCTCTTCCC-3'MGB；
SEQ8：5'VIC-TTGTCTTTCAGTATCTCTTCCC-3'MGB；
B组
用于检测位点CYP3A4*1G的引物序列：
SEQ9：5'CTTACGCTTCTGCCAGTAG 3'；
SEQ10：5'TATGTATGAACTGGCCACTC 3'；
用于检测位点CYP3A4*1G的探针序列：
SEQ11：5'FAM-CTCCATGTACCATCCACT-3'MGB；
SEQ12：5'VIC-CTCCATGTATCATCCACT-3'MGB；
用于检测位点CYP3A5*3的引物序列：
SEQ13：5'GAGAGTGGCATAGGAGATAC 3'；
SEQ14：5'AAGCCAGACTTTGATCATTA 3'；
用于检测位点CYP3A5*3的探针序列：
SEQ15：5'FAM-TGTCTTTCAATATCTCTTCCC-3'MGB；
SEQ16：5'VIC-TGTCTTTCAGTATCTCTTCCC-3'MGB；
所述特异性TaqMan双荧光探针分为特异性野生型TaqMan荧光探针和特异性突变型TaqMan荧光探针，其5’端连接有荧光报告基团，3’端连接有淬灭基团；所述特异性野生型TaqMan荧光探针和所述特异性突变型TaqMan荧光探针的荧光报告基团肯定是不同的，淬灭基团可相同可不同；
所述荧光报告基团可选自下组的报告基团：FAM、VIC、TET、JOE、HEX；
所述淬灭基团可选自下组的淬灭基团：BHQ1、BHQ2、TAMRA、MGB；
所述特异性野生型TaqMan荧光探针的荧光报告基团为FAM，淬灭基团为MGB；所述特异性突变型TaqMan荧光探针的荧光报告基团为VIC，淬灭基团为MGB。
2.根据权利要求1所述的一种检测CYP3A4、CYP3A5多态性位点的试剂盒，其特征在于，所述PCR扩增试剂包含dATP、dCTP、dGTP、dUTP、dTTP、UDG酶、Taq酶和dd H2O。
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