[发明专利]一种用流式细胞术验证植物化感作用的方法

说明书

本发明提出的是一种用流式细胞术验证植物化感作用的方法，包括如下步骤：1）植物样品流式数据的收集与分析；2）化感作用对细胞危害的验证。本发明的优点：可快速、有效且目的明确的判断化感作用对植物的细胞整体的响应，特别是对植物细胞成活率的变化影响。

技术领域

本发明涉及的是一种用流式细胞术验证植物化感作用的方法，属于生物材料检测技术领域。

背景技术

化感作用的英文为Allelopathy”，它源于希腊语“Allelon(相互)”和“Pathos(损害、妨碍)”。植物化感作用的理论是1937年由德国科学家H．Molish第一次提出，他把化感作用定义为：所有类型植物(含微生物)之间生物化学物质的相互作用，这种相互作用包括有害和有益两个方面。20世纪70年代中期E．L．Rice根据H．Molish的定义和对植物化感作用的进一步研究，界定植物化感作用是指植物(含微生物)通过释放到环境中的化学物质产生对其他植物(含微生物)的直接或间接的有害作用。Rice的定义中的化感作用物质是由植物所释放的化学物质，并强调了化感作用的结果对其他植物或微生物均是有害的。近年来，研究表明，化感物质作用的对象不仅仅是其他植物，有时甚至是同种植物。而化感作用的结果不仅包括有害的，同时也包括一些相互促进的效果。因此，又有人把化感作用称之为植物的相生相克。1984年Rice在《Allelopathy》第二版中，将化感作用给出了较完整的定义：植物或微生物的代谢分泌物对环境中其他植物或微生物有利或不利的作用，现在这个定义已被广泛的接受。

化感物质(Allelochemical)是生物体内产生的非营养性物质，能影响其他植物生长、发育、行为或种群的关系，作为化感作用的媒介，其主要是植物的次生代谢物质。植物化感作用的媒介是化学物质，被称为“化感物质”。化感物质是指植物所产生并影响其他生物生长、行为和种群的化学物质，不仅包括植物间的化学作用物质，也包括植物和动物间的化学作用物质，而且这些化学物质并没有被要求必须进入环境，也可以在体内进行。现已发现，许多化感物质不仅对植物，而且对微生物、动物特别是昆虫都有作用。

流式细胞术是应用流式细胞仪进行分析、分选的技术，对处于液流中各种荧光标记的微粒进行多参数快速准确地定性、定量测定。20世纪80年代以来，随着流式细胞仪和荧光探针标记技术的不断发展，流式细胞术在生物科学研究与医学研究及临床实践中的作用越来越重要。在植物学研究中，流式细胞术主要用于检测植物细胞核DNA含量及其倍性水平，其中 G1期的 DNA 含量可间接反映该细胞的倍性水平，因此测定植物核DNA含量的同时可以获取倍性水平相关数据。运用流式细胞术验证植物化感作用的方法是一种最快速的验证植物化感作用对于细胞整体性损害的手段。

发明内容

本发明提出的是一种用流式细胞术验证植物化感作用的方法，其目的在于快速、有效且目的明确的判断化感作用对植物的细胞整体的响应，特别是对植物细胞成活率的变化影响。

本发明的技术解决方案：一种用流式细胞术验证植物化感作用的方法，包括如下步骤：

1）植物样品流式数据的收集与分析；

2）化感作用对细胞危害的验证。

本发明的优点：可在最快20分钟内、通过活细胞的数量变化来判断化感作用对植物的细胞整体的响应，特别是对植物细胞成活率的变化影响。

附图说明

附图1~附图5是实施例中各浓度梯度下的植物细胞死亡率统计图，其中图1浓度为0%、图2浓度为12.5%、图3浓度为25%、图4浓度为50%、图5浓度为100%。

附图6是各浓度梯度下植物细胞内的MDA的含量变化图。

具体实施方式

一种用流式细胞术验证植物化感作用的方法，包括如下步骤：

1）植物样品流式数据的收集与分析；

2）化感作用对细胞危害的验证。