[发明专利]帕金森病早期检测和诊断试剂盒及装置

说明书

本发明公开了一种帕金森病早期检测和诊断试剂盒及装置。其中，该试剂盒包括用于检测红细胞中CHCHD2基因表达的试剂。应用本发明的技术方案，仅仅通过检测红细胞中CHCHD2基因的表达即可区分PD患者和健康对照，并能够实现对PD患者的早期诊断和预警；本发明所需样本为静脉血，它的抽取在临床上非常常规，抽取简单，创伤小，患者无抗拒，且检测流程简单，成本低廉，后续数据分析省时省力，出结果快，临床推广容易。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体而言，涉及一种帕金森病早期检测和诊断试剂盒及装置。

背景技术

帕金森病(Parkinson’s disease，PD)是一种临床常见的神经退行性疾病，目前对该病的诊断主要基于病史、观察主要运动指标以及对药物疗法的反应。然而，症状出现时50％的多巴胺能神经元已经凋亡，导致迟发性诊断，治疗效果差和预后不良。因此，迫切需要开发一种能够早期检测和诊断PD的方法。

目前，关于PD生物标志物的研究主要集中于发现脑脊液内的蛋白生物标志物，α-突触核蛋白及其变体受到了最多的关注。然而，脑脊液中PD蛋白生物标志物检测的缺点主要为：1)脑脊液采集困难，对患者的损伤较大，临床上患者普遍难以接受；2)缺乏早期预警和诊断的蛋白标志物，目前已有的蛋白标志物仅仅能诊断中晚期PD，而不能够早期检测出潜在的PD患者；3)灵敏度低，目前检测脑脊液中蛋白标志物多采用酶联免疫吸附(ELISA)的方法，该方法对于脑脊液中低丰度的蛋白标志物不够灵敏，而采用高灵敏度的电化学发光方法(如MSD技术)成本较高。因此，开发基于临床上容易获取的组织来源，如血液、唾液、尿液等的PD检测方法迫在眉睫。最近，关于血液中PD相关蛋白的研究受到了更多关注；然而，由于样本的复杂性目前还没有取得一致的结果。

另外，基于血液的mRNA表达变化为区分PD患者和健康对照提供了另外一种有希望的生物标志物策略。一项研究比较了伴有或不伴有体位不稳的PD患者的血细胞转录谱，发现了超过200个差异表达的基因，其中一些在PD的多巴胺能细胞模型中也发现失调，说明血液中基因表达的改变可能反映了中枢神经系统中相应基因的变化。此外，另一组研究了大量PD患者血液中的遗传特征，并确定了87个特发性PD患者和健康对照基因之间的区别，进一步支持血液中基因表达改变的改变可作为预测PD的有用指标。但是，血液中基因表达谱检测技术存在以下缺点：上述两项研究均通过基因芯片的方法对血液中表达的所有基因进行筛选，其成本较高，临床上患者难以承受。另外，由于基因较多，数据分析耗时耗力，无法满足临床上对于快速诊断的需求。而且，这两项研究均使用从全血细胞(主要是白细胞)提取的RNA，其在疾病状态期间经常发生核和转录的变化，因此容易受到其它疾病的干扰。

发明内容

本发明旨在提供一种帕金森病早期检测和诊断试剂盒及装置，适用于帕金森病早期临床检测和诊断。

为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种帕金森病早期检测和诊断试剂盒。该试剂盒包括用于检测红细胞中CHCHD2基因表达的试剂。

进一步地，试剂包括检测CHCHD2基因表达的探针和特异扩增CHCHD2基因的引物对。

进一步地，检测CHCHD2基因表达的探针具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，特异扩增CHCHD2基因的引物对具有如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。

进一步地，试剂还包括红细胞用RNA提取试剂。

进一步地，试剂盒还包括检测AHSP基因表达的探针和特异扩增AHSP基因的引物。

进一步地，检测AHSP基因表达的探针具有如SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列，特异扩增AHSP基因的引物对具有如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的核苷酸序列。

进一步地，试剂盒还包括液滴稳定剂、RT逆转录酶/Taq酶混合物以及缓冲液。