[发明专利]疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB抗体的获取方式及应用

说明书

本发明涉及疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB抗体的制备和应用。其通过PCR方法从疏螺旋体基因组扩增得到FlaB的基因片段，克隆至含组氨酸标签的原核表达载体pET30a中，再转入大肠杆菌BL21感受态细胞，通过IPTG进行诱导表达，亲和纯化得到FlaB蛋白，免疫小鼠获得了抗疏螺旋体鞭毛蛋白FlaB抗体,为疏螺旋体的检测和深入研究打下了坚实的基础。

技术领域

本发明涉及生物免疫相关领域，具体涉及疏鞭毛蛋白FlaB抗体制备方法，更具体涉利用所制备的抗体通过不同免疫学方法检测疏螺旋体的应用。

技术背景

回归热是由虱子和蜱作为媒介，疏螺旋体细菌感染引起的一种传染病(Schwan,T.G.and J.Piesman,Vector interactions and molecular adaptations of lymedisease and relapsing fever spirochetes associated with transmission byticks.Emerg Infect Dis,2002.8(2):p.115-21；Cutler,S.J.,Possibilities forrelapsing fever reemergence.Emerg Infect Dis,2006.12(3):p.369-74)。多数患者在感染后的5至15天出现临床反应，包括忽冷、忽热、头疼、肌肉或关节疼痛以及恶心反胃等症状(Ramos,J.M.,et al.,Results of a 10-year survey of louse-borne relapsingfever in southern Ethiopia:a decline in endemicity.Ann Trop Med Parasitol,2008.102(5):p.467-9；Cutler,S.J.,Relapsing fever--a forgotten diseaserevealed.J Appl Microbiol,2010.108(4):p.1115-22.)，是由螺旋体产生的内毒素样物质引起的(Snowden,J.and S.S.Bhimji,Relapsing Fever,in StatPearls.2018,StatPearls Publishing StatPearls Publishing LLC.:Treasure Island(FL).)。重症可有黄疸(Schwan,T.G.et al.),如不及时治疗，症状会反复发生,在患者自行缓解之前会经历1到4次发热(Fotso Fotso,A.and M.Drancourt,Laboratory Diagnosis of Tick-BorneAfrican Relapsing Fevers:Latest Developments.Front Public Health,2015.3:p.254；Kutsuna,S.,et al.,The first case of imported relapsing fever inJapan.Am J Trop Med Hyg,2013.89(3):p.460-1.)。虽然回归热通常是一种轻微的疾病，但可能导致患者严重不适并会发生严重的后遗症甚至死亡(Lopez,J.E.,et al.,Real-time monitoring of disease progression in rhesus macaques infected withBorrelia turicatae by tick bite.J Infect Dis,2014.210(10):p.1639-48；Forrester,J.D.,et al.,Tickborne relapsing fever-United States,1990-2011.MMWRMorb Mortal Wkly Rep,2015.64(3):p.58-60.)。回归热明确诊断主要基于在发热期采集的外周血涂片中检测螺旋体是否存在(Kutsuna,S.,et al.)。但是在发作和晚期复发之间，螺旋体可能根本不可见(Snowden,J.et al.；Forrester,J.D.,et al.)。目前尚未研发出有效疫苗。