[发明专利]玻璃体内注射的对抗体药物双重保护的微球及其制备方法

说明书

本发明提供玻璃体内注射的对抗体药物双重保护的微球及其制备方法，采用水相‑水相乳化制备单克隆抗体药物的微粒，聚乳酸‑羟基乙酸共聚物和聚缩酮为载体材料，采用水相包油相包固相的乳化溶剂挥发法制备包裹并运载右旋糖酐‑单克隆抗体药物微粒的缓释微球。有机相/水相界面和降解过程中聚乳酸‑羟基乙酸的酸性微环境引起的抗体的变性和聚集，提高微球载药量以及降低微球释放过程中的突释现象，实现了对微球中单克隆抗体药物的双重保护；聚缩酮提高微球载药量，降低聚乳酸‑羟基乙酸的酸性降解产物对眼部环境的刺激，降低了眼内炎等副作用，微球在体外环境下可以缓释单克隆抗体不少于28天，在眼内则不少于2个月，可以减少给药频次，从而减轻患者痛苦和经济负担，提高患者依从性。

技术领域

本发明涉及一种玻璃体内注射的对抗体药物双重保护的微球，本发明进一步提供了其制备方法，属于医药技术领域。

背景技术

视网膜疾病已成为我国继白内障之后的第二大致盲原因，其中年龄相关性黄斑变性(AMD)是公认的最难治疗的眼病之一，脉络膜新生血管化(CNV)是其导致视力减退的最重要原因。其中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体在病理性新生血管的增殖和修复中起着重要作用。异常的血管生成会引起眼部血管性疾病的血管渗漏。因此抗VEGF药物成为治疗湿性老年性黄斑变性的关键。

阿柏西普（Eylea®）是全球首个完全人源化的融合蛋白，一种可与VEGF-A、PIGF结合的可溶性诱饵受体，可抑制内源性VEGF受体与VEGF-A和PIGF的结合和激活，从而抑制新生血管的形成以及减少血管的通透性。未结合VEGF的阿柏西普半衰期为1~3d，而已结合VECF者半衰期为18d，这使得需要频繁玻璃体注射给药，这不仅增加了患者的痛苦及经济负担，最重要的是在重复注射的过程中发生并发症的概率也大幅度增加了，如玻璃体出血，视网膜脱离，眼内炎，白内障等。类似的治疗视网膜后部疾病的抗体药物还包括雷珠单抗（Lucentis®），贝伐单抗（Avastin®）和康柏西普等。

注射用缓释微球制剂已经被广泛用于蛋白和抗体药物的缓控释给药系统，可有效拓宽给药途径，减少给药次数和药量，因此得到越来越广泛的应用。微球制剂中目前应用最多的是基于生物可降解材料PLGA的微球制剂。该材料已被美国FDA批准用于缓释药物载体和其他人体植入的装置。但是PLGA系统主要缺点是降解材料内部酸性降解产物的累积，这会致使抗体药物吸附或聚合，导致活性丧失或产生免疫原性，并且使蛋白质释放不完全。而且在眼内给药方面，由于眼部特殊的生理结构特点，酸性物质的产生会对眼睛造成刺激，易引起眼内炎等副作用，对眼睛造成不可逆的伤害。微球有着多种制备方法，如溶剂挥发法、共乳化法、喷雾干燥法、超声波辅助雾化法、以及微流控法。对于水溶性强的抗体药物而言，将抗体药物包载于微球制剂中最常用的方法是水包油包水乳化溶剂挥发法。但是由药物分子量大，结构比较脆弱，制备过程中产生的有机相/水相界面易引起抗体的变性和聚集，致使药物活性降低。且内水相中的药物由于亲水性易扩散到外水相中，致使载药量和包封率降低。

发明内容

本发明的目的是提供一种玻璃体内注射的对抗体药物双重保护的微球及其制备方法，为治疗年龄相关性黄斑变性的载有单克隆抗体的双重保护的缓释微球的制备方法。该方法首先采用水相-水相乳化的方法制备右旋糖酐保护的单克隆抗体药物的微粒，然后以生物可降解材料聚乳酸-羟基乙酸共聚物和降解产物为中性的聚缩酮为载体材料，采用水相包油相包固相（S/O/W）的乳化溶剂挥发法制备包裹并运载右旋糖酐-单克隆抗体药物微粒的缓释微球。

本发明所述的一种玻璃体内注射的对抗体药物双重保护的缓释微球的制备方法，包括以下步骤：

1）称取450-1500mg右旋糖酐和6000mg PEG溶解于60mL去离子水中，加入单克隆抗体药物150mg，涡旋处理5min，冷冻干燥。冻干后得到的粉末用二氯甲烷离心洗涤洗3次以除去PEG分散相，真空干燥即得单克隆抗体-右旋糖酐微粒；