[发明专利]酯化牛膝多糖的制备方法

说明书

本发明公开了一种酯化牛膝多糖的制备方法，属于医药领域，其包括以下步骤，步骤A，取牛膝原料，提取粗多糖；步骤B，采用比色法确定牛膝多糖的在所述粗多糖中的含量；步骤C，用醋酸、氯磺酸和吡啶法对牛膝多糖进行酯化，最后得到酯化牛膝多糖。本发明的方法其得到的酯化牛膝多糖含量高，质量更好。

技术领域

本发明涉及一种酯化牛膝多糖的制备方法，属于医药领域。

背景技术

牛膝是我国传统常用中药材，其主要功能是“补肝肾，强筋骨，活血祛瘀，引血下行”等。现代研究表明牛膝多糖具有分子量小，免疫调节作用强，无残留、无毒副作用等优点，而牛膝多糖的酯化物则具有更强的免疫调节、抗病毒、抗肿瘤等活性，目前牛膝多糖的酯化研究多处于实验室合成，尚未有成熟的工艺来大规模生产。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种酯化牛膝多糖的制备方法，其得到的酯化牛膝多糖含量高，质量更好。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

一种酯化牛膝多糖的制备方法，包括以下步骤，

步骤A，取牛膝原料，提取粗多糖；

步骤B，采用比色法确定牛膝多糖的在所述粗多糖中的含量；

步骤C，用醋酸、氯磺酸和吡啶法对牛膝多糖进行酯化，最后得到酯化牛膝多糖。

本发明的进一步改进在于：在步骤A中提取粗多糖的方法包括以下步骤，

步骤A1，取干燥的川牛膝的根，并进行洗涤、切片、烘干和粗粉碎，得到牛膝药材粉末；

步骤A2，将牛膝药材粉末浸泡在乙醇溶液中2~4小时，去除色素和脂类；

步骤A3，通过蒸馏水回流提取牛膝多糖，并通过用三氯乙酸除蛋白2次；

步骤A4，加入无水乙醇至总体积的60%沉淀，将沉淀溶解后于50℃喷粉干燥得到粗多糖。

本发明的进一步改进在于：在步骤A1中牛膝药材粉末的粒度为24目，步骤A2中的乙醇溶液的浓度为60%~80%，所述牛膝药材粉末与乙醇溶液料液比为1:10。

本发明的进一步改进在于：步骤A3中提取温度为100℃，时间为8小时。

本发明的进一步改进在于：用醋酸、氯磺酸和吡啶法对牛膝多糖进行酯化的过程包括以下步骤，

C1，制备酯化试剂；

C2，对牛膝多糖酯化反应；

C3，对牛膝多糖酯化酯化后进行检验。

本发明的进一步改进在于：步骤C1中制备酯化试剂的方法包括以下步骤：

C11，取一定量的无水吡啶通过冰盐水预冷；

C12，逐滴加入氯磺酸和醋酸，其中氯磺酸和醋酸占总体积的10~20%，并在40min内加完；

C13，待溶液中出现大量的淡黄色固体时停止反应。

本发明的进一步改进在于：醋酸、氯磺酸与吡啶按比例为1：1∶2；反应时间为3小时，反应温度为45℃。

本发明的进一步改进在于：所述酯化反应的步骤包括：

C21，在酯化试剂中加入牛膝多糖粉末，通过95摄氏度沸水浴，恒温搅拌1小时，

C22，冷至室温；将反应液倾入一定量冰水中，并通过40%NaOH调pH到7.5；

C23，加95%乙醇至醇含量为70%，静置24小时，离心并收集沉淀，将沉淀溶于水，装入透析袋中；