[发明专利]一种蚕蛹蛋白多肽螯合钙的制备方法

权利要求书

1.一种蚕蛹蛋白多肽螯合钙的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

（1）预处理：将蚕蛹筛选去杂质，经低温烘干粉碎后，过60目筛，并进行脱脂除臭，得到蚕蛹粉；

（2）蚕蛹蛋白多肽的制备：向步骤（1）得到的蚕蛹粉中加入水，所述蚕蛹粉和所加入水的质量比为1：10～1：20，过胶体磨，过滤，然后向滤液中加入步骤（1）所述蚕蛹粉质量2～5%的碱性蛋白酶进行酶解，酶解结束后进行灭酶，并加入活性炭进行脱腥脱色，经离心、膜分离后得到蚕蛹蛋白多肽；所述膜分离的过程中，依次使用3000Da和1000Da的超滤膜截留离心后的上清液，分离得到1000～3000Da蚕蛹蛋白多肽；

（3）蚕蛹蛋白多肽的改性：使用磷酸化试剂对步骤（2）所制得的蚕蛹蛋白多肽进行改性，得到改性蚕蛹蛋白多肽；

（4）钙源的制备：配制氯化钙的水溶液，或将步骤（2）中过滤后得到的滤渣用于酸解制钙，所述的氯化钙水溶液或所述酸解制钙后的溶液即为钙离子溶液；

（5）螯合反应：将步骤（3）制得的改性蚕蛹蛋白多肽和步骤（4）制得的钙离子溶液混合，调节所述改性蚕蛹蛋白多肽与钙离子溶液中的钙离子质量的比例为2：1～10:1，在50～75℃、pH为6～8的条件下螯合反应0.5～1.5h；

（6）蚕蛹蛋白多肽螯合钙的纯化：在步骤（5）所述的螯合反应结束后，对反应液进行醇洗，经离心、干燥后得到蚕蛹蛋白多肽螯合钙；

步骤（2）所述的酶解过程中，酶解温度为50～60℃，pH值为8～9，酶解时间为3～5h，灭酶过程中，使用95℃的水浴加热灭酶10～15min；

步骤（3）所述的改性过程中，先将步骤（2）制得的蚕蛹蛋白多肽调节至浓度为20～100g/L，加入磷酸化试剂至磷酸化试剂浓度为2～10g/L，反应温度为40～60℃，pH值为5～10，反应1～2h，反应结束后透析24～48h；所述的磷酸化试剂为六偏磷酸钠、三聚磷酸钠、磷酸、多聚磷酸钠或三氯氧磷中的一种。

2.根据权利要求1所述的蚕蛹蛋白多肽螯合钙的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述的蚕蛹为鲜家蚕蛹或缫丝蚕蛹。

3.根据权利要求1所述的蚕蛹蛋白多肽螯合钙的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述脱脂除臭的过程中，以正己烷、丙酮为萃取剂，以料液质量比1:3～1:4的比例萃取8～10h，然后进行减压蒸馏，将蒸馏后剩余的固体取出烘干，得到蚕蛹粉。

4.根据权利要求1所述的蚕蛹蛋白多肽螯合钙的制备方法，其特征在于，步骤（2）加入活性炭进行脱腥脱色的过程中，加入酶解产物质量4～6%的活性炭，并在40～45℃水浴的条件下加热40～50min，所述的离心过程的条件为在6000r/min的速度下离心15～20min。

5.根据权利要求1所述的蚕蛹蛋白多肽螯合钙的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述酸解制钙的过程中，使用马弗炉将所述滤渣在520～550℃的温度下灼烧3～5h，将灰分冷却后，加入3%的盐酸溶液进行酸解，得到钙离子溶液。

6.根据权利要求1所述的蚕蛹蛋白多肽螯合钙的制备方法，其特征在于，步骤（6）所述的醇洗过程中，向步骤（5）螯合反应后的反应液中加入3～5倍体积的95%酒精，离心过程在6000r/m的速度下离心15～20min。