[发明专利]大叶白麻叶中同时分离白麻苷、异檞皮苷和绿原酸的方法

说明书

本发明公开了大叶白麻叶中同时分离白麻苷、异檞皮苷和绿原酸的方法，其特点是，包括大孔树脂柱吸附过程、洗脱液分段洗脱过程和凝胶色谱柱精制过程；本发明以大叶白麻叶为原料，经处理后得到大叶白麻叶提取物，经蒸馏水充分溶解后滤除不溶物，滤液以通过大孔树脂柱，用洗脱液分段洗脱，第一阶段洗脱液经浓缩冻干，得到纯度为52%以上的绿原酸；第二阶段洗脱液经减压蒸馏后，产物用甲醇溶解，继续使用凝胶色谱柱进行精制，得到纯度为93%以上的白麻苷和97%以上的异檞皮苷；该分离方法在一个简单的工艺过程中同时得到了高纯度的白麻苷（93%以上）和异檞皮苷（97%以上）以及绿原酸（52%以上），工艺简单可行，生产效率高，原材料利用率高，适用于工业化生产，具有较高的生产和实用价值。

技术领域：

本发明涉及大叶白麻叶活性成分分离纯化技术领域，具体地讲是大叶白麻叶中同时分离白麻苷、异檞皮苷和绿原酸的方法。

背景技术：

大叶白麻（Pocynum hendersonii (Hook. f.) Woodson）为夹竹桃科白麻属野生药用植物，也称为大花罗布麻、大花白麻。广泛分布于我国西北内陆荒漠地区及东部沿海等省区，野生在盐碱荒地、沙漠边缘、河流和湖泊周围。大叶白麻具有延缓衰老、降压、降脂、抗感冒、镇静安神等功效，常常作为中药罗布麻的替代品入药。

大叶白麻中主要含有黄酮类化合物。已从大叶白麻中发现的黄酮化合物包括白麻苷、异槲皮苷、6′′-丙二酰化-异槲皮素、芦丁、槲皮素、紫云英苷、北美圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚、三叶豆苷、异鼠李素-3-O-α-D-葡萄糖苷、金丝桃苷等。白麻苷（Quercetion-3-O-sophoroside）和异槲皮苷（Isoquercetin）是大叶白麻中含量较高的两种黄酮化合物，具有多种生物活性。白麻苷具有较强的抗肿瘤、抗氧化活性以及多巴胺能神经保护作用。异槲皮苷具有抗菌、抗真菌、抗氧化、神经保护、降压、保肝、降脂、抗癌、抗炎及利尿等作用。绿原酸也是大叶白麻的主要药效成分，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。

目前关于大叶白麻叶中黄酮类化合物的分离纯化方法的报道主要集中在大叶白麻叶中总黄酮的纯化工艺方面（史俊友等，大叶白麻中总黄酮超临界CO₂萃取工艺优化，2015；叶菊等，大孔树脂对大叶白麻叶总黄酮的分离纯化工艺研究，2010；张永秀，大叶白麻叶总黄酮提取方法研究，2009；赵明，柴达木大叶白麻叶总黄酮提取工艺及成分研究，2008），对于黄酮单体的分离纯化方法报道较少（应用高速逆流色谱法从大叶白麻中纯化三种黄酮苷的方法，CN201210182475.8），而对于大叶白麻叶中黄酮单体和绿原酸的同时分离纯化的方法还未见报道。

发明内容：

本发明的目的是克服上述已有技术的不足，而提供一种大叶白麻叶中同时分离白麻苷、异檞皮苷和绿原酸的方法，从而提高现有方法的生产效率和原料的利用率；主要解决现有的大叶白麻叶不能同时分离黄酮单体和绿原酸的问题。

本发明的技术方案是：大叶白麻叶中同时分离白麻苷、异檞皮苷和绿原酸的方法，其特殊之处在于，包括大孔树脂柱吸附过程、洗脱液分段洗脱过程和凝胶色谱柱精制过程，操作步骤如下：

a大孔树脂柱吸附过程：大叶白麻叶经过干燥粉碎、乙醇水溶液回流提取、提取液减压蒸馏后得到大叶白麻叶提取物；将大叶白麻叶提取物加入蒸馏水超声溶解，滤除不溶物，滤液流经大孔树脂柱吸附；

b洗脱液分段洗脱过程：将吸附后的大孔树脂柱先用蒸馏水充分洗脱，收集第一阶段洗脱液；再用乙醇水溶液进行洗脱，收集第二阶段洗脱液，第一阶段洗脱液经浓缩冻干，得到纯度为52%以上的绿原酸；第二阶段洗脱液经减压蒸馏得到的产物用于下一步精制；