[发明专利]一种百香果品种鉴定专用引物及其品种鉴定方法有效
| 申请号： | 201810776302.6 | 申请日： | 2018-07-13 |
| 公开（公告）号： | CN109022606B | 公开（公告）日： | 2019-10-15 |
| 发明（设计）人： | 胥猛;李安定;殷梓苡;樊航;滕尧 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学;贵州省山地资源研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 百香果 品种鉴定 专用引物 引物 分子鉴定 品种检测 指纹图谱 对引物 构建 扩增 应用 成功 | ||
1.一种百香果品种鉴定专用引物，其特征在于：为PE18引物对，其具体引物序列如下：
PE18 F：5'～GGGCATCGCAGAGTAACAG～3'，
PE18 R：5'～GCCGTCCCATACCCAAGT～3'。
2.根据权利要求1所述的百香果品种鉴定专用引物，其特征在于：百香果品种为4种，分别为：平塘1号、紫香、黄金果和满天星。
3.应用权利要求1所述百香果品种鉴定专用引物快速鉴定百香果品种的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）待测样品DNA提取；
2）使用PE18引物对，以提取的DNA为模板，进行PCR扩增；
3）PCR产物则利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法进行检测，依据扩增产物的有无和大小进行判读，对照品种指纹代码，鉴定出待测样品的品种；
其中，百香果品种为4种，分别为：平塘1号、紫香、黄金果和满天星。
4.根据权利要求3所述的快速鉴定百香果品种的方法，其特征在于，步骤1）中，利用天根生化科技有限公司的植物基因组DNA提取试剂盒完成待测样品DNA提取。
5.根据权利要求3所述的快速鉴定百香果品种的方法，其特征在于，步骤2）中，10µLPCR扩增反应体系包括：1 × Buffer；0.25mM dNTP；1mM MgCl2；0.3µM PE18引物；0.6 UTaq DNA聚合酶和15 ng DNA模板。
6.根据权利要求3所述的快速鉴定百香果品种的方法，其特征在于，步骤2）中，PCR反应程序为：预变性94℃5min；30循环，94℃30s，58℃30s，72℃30s；延伸72℃3min，最终4℃保存。
7.根据权利要求3所述的快速鉴定百香果品种的方法，其特征在于，4个百香果品种对应指纹代码分别为：平塘1号：指纹代码1BB；紫香：指纹代码1AB；黄金果：指纹代码1CC；满天星：指纹代码1AA。
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