[发明专利]一种检测抑郁症个体化药物治疗基因多位点突变的特异性引物和探针及试剂盒

权利要求书

1.一种检测抑郁症个体化药物治疗基因多位点突变的特异性引物和探针，其特征在于，

所述用于检测CYP2D6*10点位的特异性引物如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，相应的探针如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；

所述用于检测CYP2C19*2点位的特异性引物如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示，相应的探针如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示；

所述用于检测CYP2C19*3点位的特异性引物如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示，相应的探针如SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示。

所述用于检测CYP2C19*17点位的特异性引物如SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14所示，相应的探针如SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16所示。

2.根据权利要求1所述一种检测抑郁症个体化药物治疗基因多位点突变的特异性引物和探针，其特征在于，所述探针为经过荧光标记的探针，其5`端标记有报告基团，3`端标记有非荧光淬灭基团，同时探针上还连有MGB修饰基团。

3.含有权利要求1或2所述的特异性引物和探针的试剂盒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCR Mix。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR Mix的成分包括PCR反应缓冲液、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺和dNTP。

6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括野生型质控品模板、突变型质控品模板。

7.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，反应体系中优选地各条特异性引物的浓度为0.25～0.75μM，CYP2D6*10位点野生型探针浓度为0.25μM，突变型探针浓度为0.3μM；CYP2C19*2位点野生型探针浓度为0.15μM，突变型探针浓度为0.2μM；CYP2C19*3位点野生型探针浓度为0.2μM，突变型探针浓度为0.175μM；CYP2C19*17位点野生型探针浓度为0.2μM，突变型探针浓度为0.15μM。

8.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒进行荧光定量PCR反应体系为：

浓度为0.25～0.75μM、体积为0.5μL～1.25μL的引物；

CYP2D6*10位点野生型探针浓度为0.25μM，体积为0.25μL～0.625μL，突变型探针浓度为0.3μM，体积为0.3μL～0.75μL；

CYP2C19*2位点野生型探针浓度为0.15μM，体积为0.15μL～0.375μL，突变型探针浓度为0.2μM，体积为0.2μL～0.5μL；

CYP2C19*3位点野生型探针浓度为0.2μM，体积为0.2μL～0.5μL，突变型探针浓度为0.175μM，体积为0.175μL～0.45μL；

CYP2C19*17位点野生型探针浓度为0.2μM，体积为0.2μL～0.5μL，突变型探针浓度为0.15μM，体积为0.15μL～0.375μL；

6.25μL～15.5μL 2×PCR Mix，补加ddH₂O至反应的总体积为10-25μL。

9.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒进行荧光定量PCR反应程序为：(Ⅰ)95℃，10min；(Ⅱ)95℃，15s；(Ⅲ)62℃，1min；其中，(Ⅰ)进行1个循环；(Ⅱ)和(Ⅲ)进行40-45个循环。