[发明专利]一种检测抑郁症个体化药物治疗基因多位点突变的特异性引物和探针及试剂盒

说明书

本发明涉及一种检测抑郁症个体化药物治疗基因多位点突变的特异性引物和探针及试剂盒，检测的位点包括CYP2C19*2、CYP2C19*3、CYP2C19*17、CYP2D6*10。采用本发明所述试剂盒及方法可检测上述位点，操作简单，结果可靠，保证了高灵敏度、准确度以及精密度，有助于医生为患者正确选择药物并合理调整药物剂量。

技术领域

本发明涉及基因突变检测技术领域，具体涉及一种检测抑郁症个体化药物治疗基因多位点突变的特异性引物和探针及试剂盒。

背景技术

抑郁症是常见的精神疾病之一，严重者伴有自杀观念和行为，严重威胁着患者及其家人的健康和生活。目前，治疗抑郁症最有效的手段为药物干预，但是临床上单一抗抑郁药物治疗抑郁障碍仅30％的患者获得临床缓解，超过80％的患者曾出现至少一种不良反应，包括心脏毒性、性功能障碍、自杀风险、肥胖、恶心、呕吐、静坐不能、血压异常、头晕头痛、停药反应等。且抗抑郁药有起效时间较长的缺点。故预测抗抑郁药是否对患者有效以及毒副作用的大小具有重大的临床意义。

现代医学研究发现，遗传学的差异是导致药物个体疗效差异的重要原因。CYP2D6(细胞色素P450 2D6)和CYP2C19(细胞色素P450 2C19)是肝脏中的两个主要药物代谢酶。多项研究表明，CYP2D6和CYP2C19基因的单核苷酸多态性(SNPs)与抗抑郁药物的严重不良反应有关。2006年，美国肯塔基大学心理健康研究中心的Jose De Leon博士发表了精神科医生CYP2D6和CYP2C19这两个基因的检测推荐指南。中国卫健委(卫计委)于2015年7月份发布了《药物代谢酶和药物作用靶点基因检测技术指南(试行)》文件，推荐进行CYP2D6和CYP2C19基因进行检测以指导阿米替林的使用。目前全世界影响力最大的两个药物基因组专业机构，临床药物基因组学实施联盟(The Clinical PharmacogeneticsImplementation Consortium,CPIC)和荷兰药物基因组学工作组(DutchPharmacogenetics Working Group,DPWG)，也发布了针对包括舍曲林、草酸艾司西酞普兰、阿米替林等临床常用抗抑郁药物进行CYP2D6和CYP2C19基因检测的推荐指南。美国FDA(食品药品管理局)也要求多种抗抑郁药物的说明书中提示CYP2D6和CYP2C19基因多态性导致药物不良反应发生。

CYP2C19是CYP450酶第二亚家族中的重要成员，是人体重要的药物代谢酶，主要参与药物在体内的羟化反应。目前已发现CYP2C19基因至少存在25种等位基因，其中CYP2C19*2和CYP2C19*3等位基因占中国人弱代谢表型(PM)的99％以上，而超快代谢型以CYP2C19*17为主。细胞色素P450 2D6被认为是与包括抗精神病药物、止痛剂和心血管药物等许多药物的分解有关。目前已经发现100多个CYP2D6的等位基因，且其等位基因在不同种族人群中呈多元化的分布。在亚洲人群中，CYP2D6*10等位基因占改变功能的变异类型的90％。

目前，检测CYP2D6和CYP2C19常见变异基因型的方法主要有Sanger双脱氧链终止法测序和基因芯片检测。Sanger测序法检测灵敏度低，操作流程复杂，耗时较长，检测成本较高。基因芯片虽然检测位点更多，但多数位点没有明确临床意义，而且实验操作繁琐，检测成本高，由于仪器价格昂贵且应用范围窄，在医院的普及率低，故尚不适合临床推广。

中国专利申请201310433443.5“一种同时检测CYP2C19和CYP2D6基因多位点突变的试剂盒”公开了一种检测CYP2D6和CYP2C19两基因多态性的试剂盒，其涉及TaqMan-MGBSNP检测技术，尽管检测位点较多，但没有包含CYP2C19*17位点的检测。

发明内容