[发明专利]一种皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法在审
| 申请号： | 201810788137.6 | 申请日： | 2018-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN108982716A | 公开（公告）日： | 2018-12-11 |
| 发明（设计）人： | 毛善巧;粟雨桑;何海鸥;周立武 | 申请（专利权）人： | 珠海伊斯佳科技股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/74 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 谭志强 |
| 地址： | 519055 广东省珠海*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 天然保湿因子 高效液相色谱法 皮肤角质层 贴片 磷酸氢二钾溶液 皮肤角质细胞 样品前处理 标准曲线 等度洗脱 流动相 前处理 体积比 重现性 采样 乙腈 样本 绘制 | ||
1.一种皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，其特征在于：包括如下步骤：
S1、样品前处理：通过皮肤角质细胞贴片进行采样后，将贴片进行前处理，得到滤液；
S2、将得到的滤液采用高效液相色谱法进行测定样本中的天然保湿因子的含量；
S3、绘制标准曲线，计算样品中天然保湿因子的含量。
2.根据权利要求1所述的皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，其特征在于：所述高效液相色谱法的流动相条件为：体积比为95:5的20mmol/L磷酸氢二钾溶液和乙腈，等度洗脱。
3.根据权利要求2所述的皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，其特征在于：所述天然保湿因子为吡咯烷酮羧酸、顺式尿刊酸和反式尿刊酸中一种或多种。
4.根据权利要求3所述的皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，其特征在于：所述天然保湿因子为吡咯烷酮羧酸时，所述步骤S2中的高效液相色谱条件为：
色谱柱：XTerra-C18柱，4.6mm×250mm，5μm；
流速：0.8mL/min；
检测波长：205nm；
柱温：25℃；
进样量：10μL；
所述天然保湿因子为顺式尿刊酸和反式尿刊酸中的一种或两种时，所述步骤S2中的高效液相色谱条件与吡咯烷酮羧酸的高效液相色谱条件区别仅在于：检测波长为265nm。
5.根据权利要求2所述的皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，其特征在于：所述20mmol/L磷酸氢二钾溶液含有5mmol/L的庚烷磺酸钠。
6.根据权利要求2所述的皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，其特征在于：所述20mmol/L磷酸氢二钾溶液pH值为3～7。
7.根据权利要求6所述的皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，其特征在于：所述磷酸氢二钾溶液为3.7。
8.根据权利要求1-7任一项所述的皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，其特征在于：所述步骤S1中贴片前处理方法为：
将贴片剪碎，置于5mL比色管中，加入甲醇溶液至刻度，超声震荡提取30min以上，将上清液体积浓缩至1mL以下，加入水至体积为1mL，经过滤膜得到滤液，所述滤膜为0.45μm或0.22μm孔径滤膜。
9.根据权利要求8所述的皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，其特征在于：所述甲醇溶液为甲醇体积含量为10％的甲醇水溶液。
10.根据权利要求8所述的皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，其特征在于：所述将上清液体积浓缩的操作为：将上清液转移置于氮吹管中，氮吹至1mL以下。
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