[发明专利]一种皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法

说明书

本发明公开了一种皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，包括如下步骤：S1、样品前处理：通过皮肤角质细胞贴片进行采样后，将贴片进行前处理，得到滤液；S2、将得到的滤液采用高效液相色谱法进行测定样本中的天然保湿因子的含量；S3、绘制标准曲线，计算样品中天然保湿因子的含量。所述高效液相色谱法的流动相为：体积比为95:5的20mmol/L磷酸氢二钾溶液和乙腈，等度洗脱。与现有技术相比，本发明测定方法结果准确可靠、精密度高且重现性好。

技术领域

本发明涉及多种化学物质的检测技术领域，具体涉及一种皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法。

背景技术

吡咯烷酮羧酸(pyrrolidone carboxylic acid，PCA)是皮肤角质层中的天然保湿因子之一，是皮肤自身内源性生水功能的重要参与者，能够增加皮肤持水率，保持皮肤弹性和水润度，是肌肤供水之源。尿刊酸(urocanic acid，UCA)是组氨酸的代谢产物，尿刊酸含量的降低与皮肤干燥、色斑沉积、皮肤表面的pH值有直接关系，天然尿刊酸以t-UCA形式存在于皮肤角质层中，经紫外线照射转变为c-UCA。

检测皮肤角质层中的天然保湿因子，可以有效地帮助消费者了解自己的皮肤健康状态，并为化妆品企业开发更有针对性的产品提供科学检测数据支持。其中，c-UCA对于皮肤角质层pH值维持弱酸性的微环境也有一定作用。然而目前，国内外对皮肤角质层中的PCA和UCA的检测方法未见报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种能够快速、准确测定皮肤角质层中天然保湿因子的方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：一种皮肤角质层中天然保湿因子的测定方法，包括如下步骤：

S1、样品前处理：通过皮肤角质细胞贴片进行采样后，将贴片进行前处理，得到滤液；

S2、将得到的滤液采用高效液相色谱法进行测定样本中的天然保湿因子的含量；

S3、绘制标准曲线，计算样品中天然保湿因子的含量。

进一步地，所述高效液相色谱法的流动相条件为：体积比为95:5的20mmol/L磷酸氢二钾溶液和乙腈，等度洗脱。

进一步地，所述天然保湿因子为吡咯烷酮羧酸、顺式尿刊酸和反式尿刊酸中一种或多种。

优选地，所述天然保湿因子为吡咯烷酮羧酸时，所述步骤S2中的高效液相色谱条件为：

色谱柱：XTerra-C₁₈柱，(4.6mm×250mm，5μm)；

流速：0.8mL/min；

检测波长：205nm；

柱温：25℃；

进样量：10μL。

优选地，所述天然保湿因子为顺式尿刊酸和反式尿刊酸中的一种或两种时，所述步骤S2中的高效液相色谱条件为：

色谱柱：XTerra-C₁₈柱，(4.6mm×250mm，5μm)；

流速：0.8mL/min；检测波长：265nm；

柱温：25℃；

进样量：10μL。

进一步地，所述20mmol/L磷酸氢二钾溶液含有5mmol/L的庚烷磺酸钠。

进一步地，所述20mmol/L磷酸氢二钾溶液pH值为3～7，优选为3.7。

进一步地，所述步骤S1中贴片前处理方法为：