[发明专利]一种用于全自动免疫组化染色仪的二抗染色方法

权利要求书

1.一种用于全自动免疫组化染色仪的二抗染色方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、在组织切片中加入封阻液，使组织切片细胞中内源性的过氧化物酶失活；

S2、在组织切片中加入相应的一抗，与组织切片细胞内的抗原蛋白反应结合；

S3、在组织切片中加入反应增强液；

S4、在组织切片中加入聚合物二抗，与一抗特异性的结合；

S5、在组织切片中加入DAB浓缩液和DAB buffer的混合液，DAB沉淀着色；

S6、在组织切片中加入苏木素复染液，与染色质结合显蓝色。

2.根据权利要求1所述的一种用于全自动免疫组化染色仪的二抗染色方法，其特征在于，所述封阻液为过氧化氢溶液，所述过氧化氢溶液的浓度为3％-4％。

3.根据权利要求1所述的一种用于全自动免疫组化染色仪的二抗染色方法，其特征在于，所述反应增强液为兔抗鼠IgG溶液，所述兔抗鼠IgG溶液的浓度为5～10μg/mL。

4.根据权利要求1所述的一种用于全自动免疫组化染色仪的二抗染色方法，其特征在于，所述DAB浓缩液为3，3-二氨基联苯胺四氯化氢溶液，所述3，3-二氨基联苯胺四氯化氢溶液的浓度为55～70mmol/L。

5.根据权利要求1所述的一种用于全自动免疫组化染色仪的二抗染色方法，其特征在于，所述DAB Buffer为0.05～0.15％过氧化氢溶液。

6.根据权利要求1所述的一种用于全自动免疫组化染色仪的二抗染色方法，其特征在于，所述苏木素复染液的浓度为0.05～0.15％。

7.根据权利要求1-6任一权利要求所述的一种用于全自动免疫组化染色仪的二抗染色方法，其特征在于，在步骤S1之前还包括步骤S0组织切片玻片的制作，步骤为：

步骤一、烤片，烘干玻片上的水分；

步骤二、脱蜡，溶解包埋组织的石蜡，使得组织切片完全暴露；

步骤三、水化，酒精洗去脱蜡液，并使组织切片细胞内充满水；

步骤四、抗原修复，在组织切片中加入抗原修复液，暴露抗原决定簇。

8.根据权利要求1-6任一权利要求所述的一种用于全自动免疫组化染色仪的二抗染色方法，其特征在于，在步骤S6之后还包括步骤S7染色玻片的处理，包括以下步骤：

步骤一、脱水，在染色玻片上先后分别加入80％酒精、90％酒精、95％酒精和100％酒精，进行梯度脱水；

步骤二、透明，在染色玻片上加入脱蜡液；

步骤三、封片，在染色玻片上加入中性树胶进行封片。