[发明专利]HTLV-1/2抗体的快速检测方法

说明书

本发明公开了一种HTLV‑1/2抗体的快速检测方法，包括以下步骤：1)选取目的基因，并构建重组表达菌株；2)进行重组表达菌株的诱导表达、纯化及活性鉴定；3)制备金磁纳米微球，并进行功能化修饰；4)制备层析试纸条；5)进行HTLV‑1/2抗体检测。本发明有利于促进临床对ATL、TSP/HAM患者的快速诊断，以及对HIV患者、白血病患者、血透病人、等病人开展HTLV‑1/2常规筛查和检测，同时实现在血站对所有献血员进行HTLV‑1/2抗体的筛检，促进我国全面开展对于HTLV在国内的流行情况的研究，这对于明确流行于我国的HTLV毒株类型，指导制定相应防治策略，都将有十分重要的意义。

技术领域

本发明涉及医学检测领域，特别涉及一种HTLV-1/2抗体的快速检测方法。

背景技术

人T淋巴细胞病毒(HTLV)，属慢病毒亚科，可分为HTLV-Ⅰ型和HTLV-Ⅱ型。其中，HTLV-Ⅰ可引起成人T细胞病/淋巴瘤(adult T-cell leuukemia/ly mphoma，ATL)、热带痉挛性截瘫/HTLV相关性脊髓病(tropical spastic para paresis/HTLV-associatedmyelopathy)等，HTLV-Ⅱ与T-多毛细胞/巨粒细胞病(T-hairy cell/largegranulocyticleukemia)等疾病相关。除了传统的细胞学检查外，早期对血清HTLV-I/Ⅱ抗体检测多采用间接免疫荧光法(IFA)、明胶颗粒凝集反应(GPA)、放射免疫测定(RIA)、酶联免疫吸附试试验(ELISA)及蛋白印迹试验(WB)等来进行。但是由于基于抗原、抗体的免疫检测操作较为繁琐，过程不容易标准化，检测灵敏度低，容易出现假阴性结果。

现有我国存在的HTLV-1/2抗体的检测方法具有检测成本高，假阳性高，准确性低，操作繁琐耗时，国内相关检测技术及检测试剂稀少等问题，因此急需新的检测方法的出现解决上述问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提供一种HTLV-1/2抗体的快速检测方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种HTLV-1/2抗体的快速检测方法，包括以下步骤：

1)选取目的基因，并构建重组表达菌株；

2)进行重组表达菌株的诱导表达、纯化及活性鉴定；

3)制备金磁纳米微球，并进行功能化修饰；

4)制备层析试纸条；

5)进行HTLV-1/2抗体检测。

优选的是，所述步骤1)包括：选取HTLV-1的gp46、gp21，HTLV-2的gp46三个基因和通过Linker将HTLV-1的gp46、gp21与HTLV-2的gp46三个基因连接形成的一个HTLV-1/2嵌合基因作为目的基因，再将上述4个基因进行合成，分别插入到原核表达质粒中，分别获得4个重组原核表达质粒，然后再将含HTLV-1的gp46、gp21基因，含HTLV-2的gp46基因以及含HTLV-1/2嵌合基因的重组质粒分别转化到表达菌株，获得能够表达相应蛋白的重组表达菌株。

进一步优选的是，所述步骤1)具体包括：确定选取HTLV-1的gp46、gp21，HTLV-2的gp46及HTLV-1/2作为目的基因后，选择具体抗原表位序列为：

HTLV-1-gp46，162aa-109aa，Sequence ID：AAC35409.2；

HTLV-1-gp21，62aa-105aa，Sequence ID：AAA65883.1；

HTLV-2-gp46，31aa-74aa，Sequence ID：ADN52094.1；