[发明专利]一种同时定量血浆内、外源性葡萄糖的二维核磁共振方法在审

专利信息
申请号: 201810800114.2 申请日: 2018-07-20
公开(公告)号: CN108982569A 公开(公告)日: 2018-12-11
发明(设计)人: 胡凯锋;黄滔;余玲玲;马晓方 申请(专利权)人: 中国科学院昆明植物研究所
主分类号: G01N24/08 分类号: G01N24/08
代理公司: 昆明协立知识产权代理事务所(普通合伙) 53108 代理人: 旃习涵
地址: 650201 *** 国省代码: 云南;53
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摘要:
搜索关键词: 血浆 外源性葡萄糖 二维核磁共振 葡萄糖 示踪物 同位素稀释法 同位素标记 样品制备 除蛋白 前处理 衍生化 单峰 核磁 双峰 外源 量子
【权利要求书】:

1.一种同时定量血浆内、外源性葡萄糖的二维核磁共振方法,利用少量D-[U-13C]葡萄糖作为示踪物和内标的同位素稀释法,结合适应性改编的核磁单量子相关实验ID-HSQC,测定相应的双峰和单峰的积分比值,以此计算血浆中内、外源性葡萄糖浓度。

2.一种同时定量血浆内、外源性葡萄糖的二维核磁共振方法,该方法包括下述步骤:

样品制备:取适量的血浆,加入少量氘代试剂,混匀后转移到核磁管;

核磁实验:在常规灵敏度增强单量子相关实验的脉冲序列基础上,将碳通道的180度非选择性重聚脉冲改为葡萄糖1号位13C1化学位移选择性重聚脉冲,从而消除δ1,δ2及随后2τ时间内碳碳耦合的演化,即消除了碳碳耦合对谱图相位的影响;在脉冲序列的开始阶段加入90-GZ单元消除碳-13纵向磁化矢量;利用改编的脉冲序列采集二维HSQC实验数据,数据经正弦平方窗函数变迹、零填充、傅立叶变换、相位校正得图谱,积分获取对应信号的积分值;

浓度计算:利用核磁实验获得的积分值,通过下面的公式计算出内、外源葡萄糖摩尔浓度比值,

3.如权利要求1或2所述的一种同时定量血浆内、外源性葡萄糖的二维核磁共振方法,其特征在于该方法结合了同位素稀释法和HSQC核磁方法并对其进行了适应性改编,样品制备过程简单、标记葡萄糖用量少、能同时准确测定血浆内、外源性葡萄糖浓度。

4.如权利要求1或2所述的一种同时定量血浆内、外源性葡萄糖的二维核磁共振方法,其特征在于该方法在样品的制备过程中使用了氘代二甲基亚砜作为锁场试剂,在核磁实验的脉冲序列中利用了选择性重聚脉冲避免相位扭曲。

5.如权利要求1或2所述的一种同时定量血浆内、外源性葡萄糖的二维核磁共振方法,其特征在于样品制备只需往待测血浆中加入少量的锁场试剂,混匀后转移到核磁管,操作简单。

6.如权利要求1或2所述的一种同时定量血浆内、外源性葡萄糖的二维核磁共振方法,其特征在于该方法使用了氘代二甲基亚砜作为锁场试剂避免活泼氢交换。

7.如权利要求1或2所述的一种同时定量血浆内、外源性葡萄糖的二维核磁共振方法,其特征在于该方法对常规的HSQC脉冲序列进行适应性改编,采用了葡萄糖1号位13C化学位移选择性重聚脉冲,消除了同核13C1-13C2一键耦合对图谱相位的影响,从而保证图谱积分和定量分析的准确性。

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