[发明专利]一种抗CD47抗体及其应用

说明书

本发明提供一种抗CD47单克隆抗体或其抗原结合片段，其能够特异性结合CD47分子，结合之后能够阻断CD47与SIRPα的结合，并能够产生一系列生物学效应。

技术领域

本发明属于医学领域，具体涉及一种抗体或其抗原结合片段，该抗体或其抗原结合片段特异性识别人分化簇47(CD47)，能够作为免疫活化物刺激机体的免疫反应，从而产生抗肿瘤等疾病的效果。

背景技术

肿瘤是全球第二大导致人类死亡的病因。无论在发达国家还是在发展中国家，肿瘤导致的癌症都是死亡率最高的疾病，并且其死亡率和发病率仍不断增高。全球癌症疾病报告显示：过去十年里，全球癌症发病率升高了33％。仅2015年，就有1520万人被诊断为癌症，并有880万人因此死亡；发展中国家的癌症死亡率高于发达国家，患病人数占到全球的57％，死亡人数高达全球的65％，因此抗肿瘤药物市场的潜力十分巨大。

几乎所有肿瘤细胞都具有通过提高自身CD47蛋白表达，不但使其周围多种免疫细胞正常免疫杀伤功能受到抑制，而且表现出促进肿瘤组织扩增和转移的特性，这种特性能够导致患者病情进一步恶化。相关研究表明，阻断肿瘤细胞CD47相关的信号通路，能够解除肿瘤细胞对免疫细胞的抑制作用，从而激活肿瘤微环境中免疫细胞，尤其是巨噬细胞的杀伤功能，杀伤肿瘤细胞；活化的巨噬细胞通过吞噬靶细胞，发挥其抗原提呈的功能，特异性的活化T细胞，通过活化的T细胞发挥的细胞毒作用，进一步杀伤肿瘤细胞。

利用抗体结合细胞表面蛋白靶点治疗多种肿瘤和类风湿等免疫疾病已取得显著的效果；截至目前，经FDA批准上市的相关药物已超过60种。相关研究已经证明，利用抗CD47单克隆抗体，在体内特异性结合肿瘤细胞表面高表达的CD47蛋白，能够有效解除肿瘤细胞对免疫细胞的抑制作用，重新恢复机体免疫细胞功能，达到抑制肿瘤生长的效果。

发明内容

本发明的一个方面在于提供一种能够与CD47分子特异结合的抗CD47抗体或其抗原结合片段，所述抗CD47抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4和SEQ IDNO：5所示的重链CDRs；以及SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示的轻链CDRs。

在本发明的实施方案中，所述抗CD47抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO：1所示的重链可变区和SEQ ID NO：2所示的轻链可变区；或包含SEQ ID NO：9所示的重链可变区和SEQ ID NO：10所示的轻链可变区。

在本发明的实施方案中，所述抗CD47抗体包含SEQ ID NO：11所示的重链和SEQ IDNO：12所示的轻链。

在本发明的实施方案中，所述抗原结合片段选自Fα b、Fαb′、Fαb′-SH、Fv、scFv、F(αb′)₂、双抗体和包含CDR的肽，所述抗CD47抗体或其抗原结合片段阻断CD47与SIRPα的结合。

在一些实施方式中，所述抗CD47抗体或其抗原结合片段为鼠源或人源化抗CD47单克隆抗体。优选地，所述人源化的抗CD47抗体或其抗原结合片段包含人Fc区，更优选为人IgG4的Fc区。

本发明的一个方面涉及多肽，其包含SEQ ID NO：9所示的序列，其中所述多肽是特异性结合CD47的抗体的一部分，并且所述抗体还包含SEQ ID NO：10所示的多肽。

本发明的一个方面涉及多肽，其包含SEQ ID NO：10所示的序列，其中所述多肽是特异性结合CD47的抗体的一部分，并且所述抗体还包含SEQ ID NO：9所示的多肽。

本发明的一个方面涉及多肽，其包含SEQ ID NO：1所示的序列，其中所述多肽是特异性结合CD47的抗体的一部分，并且所述抗体还包含SEQ ID NO：2所示的多肽。