[发明专利]杨树叶绿体全基因组PCR扩增引物及其应用

权利要求书

1.杨树叶绿体全基因组PCR扩增引物，其特征在于共有33对引物，分别包括上游引物和下游引物，

所述33对引物如下：

2.如权利要求1所述的引物在杨树叶绿体全基因组序列PCR扩增中的应用，其特征在于具体步骤如下：

1)从杨树样本材料嫩叶中提取到总DNA样品；

2)用权利要求1所述的引物进行PCR扩增，由于每对引物扩增产物长度均在4kb及以上，采用长片段PCR扩增技术进行杨树叶绿体全基因组序列的目的片段的扩增；

3)步骤2)得到的PCR扩增产物经0.5％琼脂糖凝胶电泳检测，若存在分子量与特异引物设计扩增长度相一致的单一条带，则说明扩增成功；

4)将步骤3)中经过检测扩增成功的33对特异引物PCR产物送生物技术公司，经过产物纯化、定量与均一化、pacbio文库制备及Sequel/RSII测序，去除测序片段两端的barcode序列，经过reads聚类分析及subreads的自我矫正，采用minimus2进行拼接组装，得到杨树叶绿体全基因组序列；

5)应用OGdraw软件构建杨树叶绿体全基因组结构图。