[发明专利]乳腺外paget病小鼠模型的构建方法

权利要求书

1.乳腺外paget病小鼠模型的构建方法，其特征在于，将K14rtta转基因小鼠与TRE-Msi1转基因小鼠进行交配，产生的子代小鼠通过饲喂四环素，检测到基因Musashi1过表达的小鼠，即为乳腺外paget病小鼠；

鉴定乳腺外paget病小鼠的具体方法如下：

(1)提取小鼠基因组DNA作为模板，以F1和R1为引物，进行PCR扩增，检测扩增产物，出现500bp的特征条带；

(2)提取小鼠基因组DNA作为模板，以F2、R2和G为引物，进行PCR扩增，检测扩增产物，出现300bp和500bp两条特征条带；

同时满足上述(1)和(2)的为乳腺外paget病小鼠；

所用引物序列如下：

F1:5′-CACGATACACCTGACTAGCTGGGTG-3′

R1:5′-CACGATACACCTGACTAGCTGGGTG-3′

F2:5′-CCCTCCATGTGTGACCAAGG-3′

R2:5′-GCACAGCATTGCGGACATGC-3′

G:5′-GCAGAAGCGCGGCCGTCTGG-3′。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，子代小鼠长到6周时，向小鼠的饮水中添加四环素，让小鼠自由饮水，保证饮水充足，诱导基因Musashi1过表达，水中添加的四环素终浓度为0.2g/L。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，饲喂四环素48h后，出现乳腺外paget病样症状的小鼠，即为乳腺外paget病小鼠。

4.由权利要求1-3任一项所述方法构建的乳腺外paget病小鼠模型在乳腺外paget病致病机理研究中的应用。

5.由权利要求1-3任一项所述方法构建的乳腺外paget病小鼠模型在筛选乳腺paget病治疗药物中的应用。