[发明专利]鉴别何首乌和棱枝何首乌的分子特异性标记引物及方法在审
| 申请号： | 201810837957.X | 申请日： | 2018-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN108841992A | 公开（公告）日： | 2018-11-20 |
| 发明（设计）人： | 彭华胜;解会群;彭代银;赵玉姣;查良平;程铭恩 | 申请（专利权）人： | 安徽中医药大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙) 11548 | 代理人： | 李静 |
| 地址： | 230012 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 何首乌 分子特异性标记引物 扩增产物 鉴别 快速分子 上游引物 下游引物 常规的 物种 | ||
1.鉴别何首乌和棱枝何首乌的分子特异性标记引物，其特征在于，所述分子特异性标记引物的核苷酸序列如下：
上游引物FMF：5’-ATGTTTTCCATACCTTACCCACT-3’；
下游引物FMR：5’-TTTCATCATTTTTATTCTCTCCG-3’。
2.一种根据权利要求1所述的分子特异性标记引物进行鉴别何首乌F.multiflora和棱枝何首乌F.multiflora var.angulata的方法，其特征在于，步骤如下：
(1)首先提取待测何首乌标本基因组DNA作为模板，以分子特异性标记引物作为扩增引物，进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；
(2)然后对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测：若电泳结果出现191bp的DNA条带，则待测何首乌样本为何首乌F.multiflora；若电泳结果不出现191bp的DNA条带，则待测何首乌样本为棱枝何首乌F.multiflora var.angulata。
3.根据权利要求2所述的分子特异性标记引物进行鉴别何首乌F.multiflora和棱枝何首乌F.multiflora var.angulata的方法，其特征在于，步骤(1)中PCR扩增的反应程序为：95℃下预变性1min；然后在95℃下变性5s、48℃下退火30s、72℃下延伸45s，进行30个循环；最后于72℃下延伸7min；保存在4℃。
4.根据权利要求2所述的分子特异性标记引物进行鉴别何首乌F.multiflora和棱枝何首乌F.multiflora var.angulata的方法，其特征在于，步骤(2)中电泳检测方法具体为：用2.5％的琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物，然后利用凝胶成像分析仪拍照，若电泳结果出现191bp的DNA条带，则待测何首乌物种为何首乌F.multiflora，若电泳图上未出现191bp的DNA条带，则待测何首乌物种则为棱枝何首乌F.multiflora var.angulata。
5.一种根据权利要求1所述的分子特异性标记引物在鉴别何首乌F.multiflora和棱枝何首乌F.multiflora var.angulata中的应用。
6.一种利用权利要求1所述的分子特异性标记引物制备的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括所述的分子特异性标记引物。
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