[发明专利]种子特异性部位油脂含量检测方法及其QTL位点鉴定方法在审
申请号: | 201810838991.9 | 申请日: | 2018-07-27 |
公开(公告)号: | CN109060862A | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 栗茂腾;郭亮星;赵卫国;朝红波;尹永泰;付春华;王灏;张礼斌 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学;陕西省杂交油菜研究中心 |
主分类号: | G01N24/08 | 分类号: | G01N24/08;G01N30/02 |
代理公司: | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人: | 曹葆青;李智 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 组织部位 位点鉴定 油料作物种子 油料作物 特异性部位 表型分型 含量检测 表型 位点 遗传连锁图谱 作物遗传育种 特异性组织 定量成像 定位群体 核磁共振 聚合育种 理论支持 内部组织 扫描分析 高油脂 精准化 品系 无损 三维 基因 检测 | ||
1.一种油料作物种子特异性组织部位油脂含量的检测方法,其特征在于,包含以下步骤:
(1)将油料作物种子在不破损的状态下进行核磁共振成像,得到油料作物种子油脂分布图像;
(2)将步骤(1)所述油脂分布图像进行不同组织部位图像分割,并将相同组织部位进行三维图像重构,得到各组织部位的信号强度和整粒种子的信号强度;
(3)提取步骤(1)所述油料作物种子的总油脂,并测定该种子总油脂含量;
(4)通过步骤(3)所述的总油脂含量与步骤(2)所述整粒种子的信号强度,建立信号强度与油脂含量的标准曲线;
(5)根据步骤(4)所述的标准曲线和步骤(2)所述种子各组织部位的信号强度,计算得到油料作物种子不同组织部位的油脂含量。
2.如权利要求1所述油料作物种子不同组织部位油脂含量的检测方法,其特征在于,步骤(1)所述油料作物种子为油菜种子、花生种子、大豆种子、芝麻种子、葵花种子或胡麻种子。
3.如权利要求1所述油料作物种子不同组织部位油脂含量的检测方法,其特征在于,步骤(3)所述提取是通过酸催化的甲酯化反应进行提取。
4.如权利要求1所述油料作物种子不同组织部位油脂含量的检测方法,其特征在于,步骤(3)所述测定是通过气相色谱仪对步骤(3)中提取的总油脂进行各脂肪酸组分测定,根据测得的各脂肪酸组分的峰面积与标准品的峰面积的比值,得到总油脂含量。
5.如权利要求4所述油料作物种子不同组织部位油脂含量的检测方法,其特征在于,所述标准品为十七碳酸。
6.一种油料作物种子特异性组织部位油脂含量QTL的鉴定方法,其特征在于,包含以下步骤:
(1)将油料作物定位群体的种子在不破损的状态下进行核磁共振成像,得到油料作物定位群体的种子油脂分布图像;
(2)将步骤(1)所述油脂分布图像进行不同组织部位图像分割,并将相同组织部位进行三维图像重构,得到各组织部位的信号强度和整粒种子的信号强度;
(3)提取步骤(1)所述油料作物定位群体的种子的总油脂,并测定该总油脂含量;
(4)通过步骤(3)所述的总油脂含量与步骤(2)所述整粒种子的信号强度,建立信号强度与油脂含量的标准曲线;
(5)根据步骤(4)所述的标准曲线和步骤(2)所述种子各组织部位的信号强度,计算得到油料作物定位群体的种子不同组织部位的油脂含量;
(6)利用所述油料作物定位群体的遗传连锁图谱,根据步骤(5)所述油料作物定位群体的种子不同组织部位油脂含量,进行复合区间作图,对控制不同组织部位油脂含量性状QTL进行检测,将至少在两个以上环境检测到的QTL鉴定为所述油料作物定位群体的种子特异性组织部位油脂含量的QTL位点。
7.如权利要求6所述油料作物种子特异性组织部位油脂含量QTL的鉴定方法,其特征在于,步骤(1)所述油料作物定位群体为油菜定位群体、花生定位群体、大豆定位群体、芝麻定位群体、葵花定位群体或胡麻定位群体。
8.如权利要求6所述油料作物种子特异性组织部位油脂含量QTL的鉴定方法,其特征在于,步骤(2)所述不同组织部位为种皮、外子叶、内子叶和胚轴,或者步骤(2)所述不同组织部位为胚乳、胚芽和胚轴。
9.如权利要求6所述油料作物种子特异性组织部位油脂含量QTL的鉴定方法,其特征在于,步骤(1)所述油料作物定位群体为单双倍体分离群体;所述单双倍体分离群体为不同油脂含量的亲本杂交后的F1代花粉经染色体加倍后获得;
优选地,步骤(1)所述油料作物定位群体为不同油脂含量的亲本杂交后的F1代自交后得到的F2代;或者步骤(1)所述油料作物定位群体为不同油脂含量的亲本杂交后的F1代与任一亲本杂交的回交群体;或者步骤(1)所述油料作物定位群体为不同油脂含量的亲本杂交后的F1代经过至少四代连续自交的重组近交系群体。
10.如权利要求9所述油料作物种子特异性组织部位油脂含量QTL的筛选方法,其特征在于,所述不同油脂含量亲本为油菜品系N53-2和油菜品系垦C-8。
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