[发明专利]马昔腾坦有关物质的高效液相色谱分析方法

说明书

本发明公开了一种马昔腾坦有关物质的高效液相色谱分析方法，该方法采用反相C18柱，以8～12mmol/L磷酸二氢钾水溶液‑乙腈为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；其中磷酸二氢钾水溶液用氢氧化钠调节pH为4.5～5.5。本方法可对马昔腾坦原料药的有关物质进行快速准确的定性及定量分析。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及马昔腾坦有关物质的高效液相色谱分析方法。

背景技术

马昔腾坦是由Actelion开发的双重内皮素受体拮抗剂，2013年FDA批准上市，临床用于肺动脉高压的治疗。其结构式如下所示：

对原料药及制剂进行质量控制一直是药物研发中的重点和难点，而对杂质的研究又是质量控制中的重中之重。马昔腾坦合成过程中的起始原料、中间体、副产物及降解产物等均可能成为残留在终产品中的杂质，进而影响产品质量。

目前对马昔腾坦有关物质的研究以及质控分析方法的研究鲜有文献报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种马昔腾坦及其有关物质的高效液相色谱分析方法。

本申请发明人对马昔腾坦合成过程中可能存在的杂质进行了深入分析，并鉴定了以下9个杂质：

本发明提供的方法可以实现马昔腾坦与上述9个杂质的分离测定，实现主峰与各杂质峰的分离度≥1.5、各杂质间的分离度≥1.2。本发明的高效液相色谱分析方法包括以下步骤：

(1)色谱条件设置：采用反相C18柱，以8～12mmol/L磷酸二氢钾水溶液-乙腈为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；其中磷酸二氢钾水溶液用氢氧化钠调节pH为4.5～5.5；

(2)样品溶液配制：采用极性溶剂溶解马昔腾坦原料，配制成浓度为0.1～1mg/mL的溶液；

(3)检测：取配制的马昔腾坦溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析。

其中，步骤(1)中梯度洗脱优选采用以下方式：

所述流动相A中磷酸二氢钾水溶液与乙腈的比例为85～95：15～5，优选90：10；

步骤(1)中柱温为25～35℃；检测波长为210～310nm，优选210nm；流动相速度为0.8～1.2mL/min，优选1.0mL/min；

步骤(3)中极性溶剂选自乙腈、甲醇，优选乙腈；进样量为10～20μL；

优选采用色谱柱为250×4.6mm、粒径5μm的YMC-Pack ODS-A。

本发明的有益效果：采用本发明的方法可有效分离及测定马昔腾坦原料药及制剂中的有关物质，上述9个杂质可以同时测定，各杂质峰间的分离度≥1.2，主峰与杂质峰间的分离度≥1.5。利用本发明的方法可以快速准确地进行原料药马昔腾坦及其制剂的有关物质的定性及定量分析，保证马昔腾坦及其制剂的质量可控性。

附图说明

图1是实施例2中杂质A定位溶液的色谱图

图2是实施例2中杂质B定位溶液的色谱图

图3是实施例2中杂质C定位溶液的色谱图

图4是实施例2中杂质D定位溶液的色谱图

图5是实施例2中杂质E定位溶液的色谱图

图6是实施例2中杂质H定位溶液的色谱图