[发明专利]一种鲎血血细胞蛋白活性肽的制备方法

权利要求书

1.一种鲎血血细胞蛋白活性肽在制备阿尔茨海默症药物中的用途，其特征在于，所述鲎血血细胞蛋白活性肽制备方法具体包括如下步骤：

S1：将鲎血细胞置于冷冻管，按已设定程序的可程序降温机中每分钟降 1℃～3℃至低温-15℃～-20℃间，冷冻11h～13h，然后至0℃～4℃解冻，完全融化，如此反复冻融三次；

S2：温度保持在0℃～4℃间，将S1所得鲎血血细胞磁力搅拌8min～13min，致鲎血细胞完全破裂；

S3：温度保持在0℃～4℃间，将S2所得破裂鲎血血细胞进行低温离心处理，速率3500rpm～4500rpm，15 min～25 min，然后收集固体沉淀，用蒸馏水冲洗3～5次，至得到鲎血细胞膜组织；

S4：用酶活3800u/g～4200u/g的胰酶粉酶解S3所得鲎血细胞膜组织，酶解条件：pH7.0，70℃，酶浓度1.8mg/mL～2.4mg/mL，底物浓度2.0mg/mL～6.0mg/mL，酶解4h～6h；

S5：将S4所得酶解液置于低温冷冻离心机中，温度保持在0℃～4℃间, 速率3500rpm～4500rpm离心分离15min～25min，得到上清液；

S6：温度保持在-50℃，将S5所得上清液冷冻至干燥完全为止，获得鲎血血细胞蛋白活性肽。

2.根据权利要求1所述鲎血血细胞蛋白活性肽在制备阿尔茨海默症药物中的用途，其特征在于，步骤S1的冷冻温度为-18℃，融化温度为4℃。

3.根据权利要求1所述鲎血血细胞蛋白活性肽在制备阿尔茨海默症药物中的用途，其特征在于，步骤S2的温度保持在4℃，磁力搅拌10 min。

4.根据权利要求1所述鲎血血细胞蛋白活性肽在制备阿尔茨海默症药物中的用途，其特征在于，步骤S3的温度保持在4℃，离心速率4000 rpm，20min。

5.根据权利要求1所述鲎血血细胞蛋白活性肽在制备阿尔茨海默症药物中的用途，其特征在于，步骤S4的胰酶粉，酶活为4000u/g，酶解条件，pH7.0，温度70℃，酶浓度2.2 mg/mL，底物浓度4.0 mg/mL，酶解5h。

6.根据权利要求1所述鲎血血细胞蛋白活性肽在制备阿尔茨海默症药物中的用途，其特征在于，步骤S5的离心分离，温度4℃, 4000rpm，20min离心分离得到上清液。

7.根据权利要求1所述鲎血血细胞蛋白活性肽在制备阿尔茨海默症药物中的用途，所述的鲎血血细胞蛋白活性肽能够有效抑制清除羟自由基和乙酰胆碱酯酶。