[发明专利]一种组合制备银杏酸的方法

权利要求书

1.一种分离总银杏酸中单体化合物的方法，包括以下步骤：

(1)将银杏果外种皮与白果分离，外种皮置于阴凉处干燥，干燥后的外种皮采用石油醚提取三次，得到总银杏酸提取物；

(2)将总银杏酸提取物进行β-环糊精包合，得到β-环糊精-银杏酸包合物；

(3)将所述β-环糊精-银杏酸包合物采用pH区带逆流色谱进行分离和富集，得到相应组分，所述pH区带逆流色谱采用的两相溶剂体系为正庚烷/乙酸乙酯/甲醇/水；

(4)将富集组分进行循环逆流色谱模式分离纯化，制得β-环糊精-银杏酸包合物单体，所述循环逆流色谱采用的两相溶剂体系为正庚烷/乙酸乙酯/甲醇/乙酸；

(5)将上述包合物单体溶液加入盐溶液，将β-环糊精与银杏酸单体解离，加入低极性溶剂萃取，减压干燥即得银杏酸单体；

步骤(3)中，所述pH区带逆流色谱两相溶剂体系中正庚烷/乙酸乙酯/甲醇/水的体积比为2:1:0.5-1.5:1；将两相溶剂体系正庚烷/乙酸乙酯/甲醇/水，摇匀后置于分液漏斗中平衡一段时间，待分层后将上下两相分开，上相中加入盐酸进行酸化，下相加三乙胺进行碱化，所述盐酸与三乙胺的毫摩尔比为8:1；

步骤(4)中，正庚烷/乙酸乙酯/甲醇/乙酸的体积比为5:3.5-4.5:0.5-1.5:0.5-1.5。

2.如权利要求1所述的一种分离总银杏酸中单体化合物的方法，其特征在于，所述步骤(1)的具体操作为：将银杏果外种皮与白果分离，外种皮置于阴凉处干燥，干燥后的外种皮，用石油醚回流提取3次，每次2-3h，然后将提取物使用真空过滤装置过滤，合并所有提取液，55±5℃旋蒸除去溶剂，得到总银杏酸提取物。

3.如权利要求2所述的一种分离总银杏酸中单体化合物的方法，其特征在于，所述外种皮与石油醚的配比为，1kg外种皮需要加入2-2.5L石油醚。

4.如权利要求1所述的一种分离总银杏酸中单体化合物的方法，其特征在于，所述步骤(2)的具体操作为：取蒸馏水加入β-环糊精于60±5℃进行磁力搅拌，转速为1000转/分钟，至完全溶解，再加入所述银杏酸总提取物，避光60±5℃搅拌48h，将溶液于40±5℃蒸干水分，得β-环糊精-银杏酸包合物。

5.如权利要求4所述的一种分离总银杏酸中单体化合物的方法，其特征在于，所述蒸馏水：β-环糊精：银杏酸总提取物的配比为1L：15g：5g。

6.如权利要求1所述的分离总银杏酸中单体化合物的方法，其特征在于，所述步骤(3)的具体操作为：将两相溶剂体系正庚烷/乙酸乙酯/甲醇/水，摇匀后置于分液漏斗中平衡一段时间，待分层后将上下两相分开，上相中加入盐酸进行酸化，下相加三乙胺进行碱化，取所述β-环糊精-银杏酸包合物，溶解于10mL酸化的上相和10mL未碱化的下相待用；采用半制备型高速逆流色谱仪，首先使进样阀处于进样状态，将固定相用泵以一定流速灌满色谱分离柱，停泵；开启速度控制器，使高速流色谱仪的色谱分离柱正转，转速达800转/min时，将溶解好的样品用注射器注入逆流色谱仪进样阀中，旋转进样阀为接柱状态，使样品进入色谱分离柱；设置流动相流速为2.0mL/min，开始泵流动相，然后根据紫外光谱检测结果，对各部分组分进行接收，得到混合组分I和IV，单体组分2，3，4；所述固定相为上相，流动相为下相。

7.如权利要求1所述的分离总银杏酸中单体化合物的方法，其特征在于，所述步骤(4)的操作为：

1)切换六通阀至常规分离模式，将逆流色谱两相溶剂体系进行流体动力学平衡，平衡好后，将组分I或IV进样；

2)切换六通阀，进行样品的循环逆流色谱，实现样品的内循环分离；

3)待分离的样品充分分离后，切换六通阀，进入常规洗脱模式，依据紫外光谱检测结果依次对分离组分进行接收；高速逆流色谱仪柱体积为300mL，上样量500mg，转速800转/min，上相为固定相，下相为流动相，流速2.0mL/min，检测波长254nm。