[发明专利]一种甘蔗线条花叶病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒及制备与检测方法在审
| 申请号： | 201810882741.5 | 申请日： | 2018-08-06 |
| 公开（公告）号： | CN108776229A | 公开（公告）日： | 2018-11-09 |
| 发明（设计）人： | 贺振;陈春峰;陈雯;甘海峰;张坤 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 薛海霞;董建林 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 花叶病毒 甘蔗 线条 制备 酶联免疫检测试剂盒 双抗体夹心 检测 酶标抗体 微孔板 辣根过氧化酶标记 特异性多克隆抗体 基因工程表达 多克隆抗体 甘蔗生产 经济实用 外壳蛋白 缓冲液 免疫原 脱毒苗 显色液 血清学 终止液 抗原 包被 灵敏 防治 | ||
1.一种甘蔗线条花叶病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括SCSMV特异性多克隆抗体，SCSMV特异性多克隆抗体包被于多克隆抗体包被板上。
2.根据权利要求1所述的一种甘蔗线条花叶病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述SCSMV特异性多克隆抗体的氨基酸序列为：GTQPPQNQSSSPATTSSISSTTTSQVGSQTTGNLSNTVSQTMKSLYVPPLVKSLKTEAKAKQMMRYTPPQALISSSAASIRQFNDWANTAAEGYGKTIQQFTDEILPFWIYWCVVNGATEENKTKPKWTKAVLNLDGADGTEITVDENGPQVEFEMGPMYRNAKPGIRAIMRHFGELAYKWVRFSVRSGKPIIPHNAVKAGLTTPEFYPCCIDFVMVNILSPAEIDVRNQVINARTPRMGKPLFRHALRAGGDEDTDLRREDDANYGRTQIGGAHFGRAQH。
3.根据权利要求1所述的一种甘蔗线条花叶病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括辣根过氧化酶标记多克隆抗体、基因工程重组SCSMV外壳蛋白标准品、质控品。
4.根据权利要求1或3所述的一种甘蔗线条花叶病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，还包括辅助试剂：提取反应液、洗涤缓冲液、酶缓冲液、显色剂及反应终止液。
5.一种权利要求1至4任意一项所述检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括基因工程重组SCSMV外壳蛋白标准品的制备步骤、SCSMV特异多克隆抗体的制备步骤、多克隆抗体包被板的制备步骤、辣根过氧化酶标多克隆抗体的制备步骤、质控品的制备以及辅助试剂的制备步骤。
6.根据权利要求5所述的检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述SCSMV外壳蛋白标准品的制备步骤中，以感染SCSMV的甘蔗叶片的总RNA为模版，使用引物：SEQ ID No、1的SCSMCPF和SEQ ID No、2的SCSMCPR扩增获得SCSMV的CP基因，克隆入pET-28a载体得到重组质粒pET28a-SCSMCP，经原核表达纯化获得31 kDa的外壳蛋白。
7.根据权利要求5所述检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述多克隆抗体包被板，用纯化的SCSMV外壳蛋白免疫动物获得的SCSMV特异性多克隆抗体包被酶标板制作而成。
8.根据权利要求5所述检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述辣根过氧化物酶标多克隆抗体，用纯化的SCSMV外壳蛋白免疫动物获得的SCSMV特异性多克隆抗体标记辣根过氧化物酶制作而成。
9.一种甘蔗线条花叶病毒的检测方法，其特征在于，使用权利要求1-4任意一项所述的试剂盒对甘蔗线条花叶病毒进行检测。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于扬州大学，未经扬州大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810882741.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
