[发明专利]液相色谱串联质谱法同时检测多种氨基酸的试剂盒及其应用

说明书

本发明公开一液相色谱串联质谱法同时检测多种氨基酸的试剂盒，所述试剂盒内包括对应33种氨基酸的混合内标物；33种氨基酸标准品：洗脱液A：10mM甲酸铵+0.1％甲酸水溶液；洗脱液B：0.1％甲酸乙腈溶液；衍生化试剂：正丁醇+乙酰氯；稀释剂：甲醇溶液；质控品：高质控品以及低质控品，所述试剂盒可用于同时高效地检测33种氨基酸，检测灵敏度高、特异性强、前处理过程简单，可快速并同时完成多种氨基酸的分离与检测。

技术领域

本发明涉及血液检测技术，特别涉及一种液相色谱串联质谱法同时检测多种氨基酸的试剂盒及其应用，所述试剂盒适用于使用串联质谱法同时高效地检测干血片/血浆/血清中33种氨基酸。

背景技术

氨基酸是构成生物体蛋白质并同生命活动有关的最基本的物质，是在生物体内构成蛋白质分子的基本单位，与生物的生命活动有着密切的关系。关于氨基酸的研究是代谢学中最为重要的一环，在正常的情况下，氨基酸在体内的分布处于一个平衡状态，这一状态的失衡是众多疾病的诱因或表现形式。因此，氨基酸检测可以作为健康诊断和疾病筛查的重要手段，可以为及早预防疾病、改善身体营养状态和营养补充提供参考标准，氨基酸的精确检测可以揭示人体内详细的氨基酸代谢状况，从而从不同的代谢路径，如神经内分泌系统、氨能量代谢系统或者是硫代谢等方面提示人体的健康状况。

常见的氨基酸有：γ-氨基丁酸、DL-2-氨基己二酸、肌氨酸、6-氨基己酸、同型精氨酸、丙氨酸、3-甲基-L型组氨酸、天冬氨酸、L-甲硫氨酸、羟基脯氨酸、L-2-氨基丁酸、天门冬酰胺、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、精氨酸、L-酪氨酸、丝氨酸、鸟氨酸、组氨酸、亮氨酸、脯氨酸、谷氨酸、赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丙氨酸、DL-3-氨基异丁酸、犬尿氨酸、瓜氨酸、1-甲基-L型组氨酸、高脯氨酸。如果人体缺乏任何一种必需氨基酸，就可导致生理功能异常，影响机体代谢的正常进行，最后导致疾病。同样，如果人体内缺乏某些非必需氨基酸，会产生机体代谢障碍。举例来说，精氨酸和瓜氨酸对形成尿素十分重要；胱氨酸摄入不足就会引起胰岛素减少，血糖升高。又如创伤后胱氨酸和精氨酸的需要量大增，如缺乏，即使热能充足仍不能顺利合成蛋白质。总之，氨基酸在人体内通过代谢可以发挥下列一些作用：①合成组织蛋白质；②变成酸、激素、抗体、肌酸等含氨物质；③转变为碳水化合物和脂肪；④氧化成二氧化碳和水及尿素，产生能量。

目前国内外使用的氨基酸检测方法有电化学法、分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法及气相色谱法等，高效液相色谱法是目前使用最为普遍的方法，然而目前市面上还没有可以高效地同时检测以上提及的33种氨基酸的方法，也就是说，虽然目前市面上有针对某些或者某类氨基酸的液相色谱串联质谱法，但是这些方法的检测范围是局限的。当医疗人员想要了解病患体内氨基酸的情况时，需要采用多种针对性的方法，这样不仅仅提高了检测的成本，又降低了检测的效率，也加大了病患的痛苦。

发明内容

本发明的目的在于提供一液相色谱串联质谱法同时检测多种氨基酸的试剂盒及其应用，所述试剂盒可被适用于使用串联质谱法同时检测干血片/血浆/血清中的33种氨基酸，并且其检测灵敏度高、特异性强、前处理过程简单，可快速并同时完成多种氨基酸的分离与检测。

本发明提供的试剂盒用于同时检测多种氨基酸，具体而言，同时检测33种氨基酸，其中33种氨基酸为：γ-氨基丁酸、DL-2-氨基己二酸、肌氨酸、6-氨基己酸、同型精氨酸、β-丙氨酸、3-甲基-L型组氨酸、天冬氨酸、L-甲硫氨酸、羟基脯氨酸、L-2-氨基丁酸、天门冬酰胺、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、精氨酸、L-酪氨酸、丝氨酸、鸟氨酸、组氨酸、亮氨酸、脯氨酸、谷氨酸、赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丙氨酸、DL-3-氨基异丁酸、犬尿氨酸、瓜氨酸、1-甲基-L型组氨酸、高脯氨酸。为了便于说明，这33种氨基酸在本发明中统称之为氨基酸组，其后提到的内标物也统称为内标物组。

所述试剂盒包括以下试剂：