[发明专利]一种基于TiO2

说明书

本发明公开一种基于TiO₂介晶诱导的共振能量转移型电化学发光及对卵巢癌标记物的免疫传感方法，特点是基于锐钛矿TiO₂介晶和Envision复合物，分别引入钌联吡啶及核/壳量子点作为能量供体/受体对。锐钛矿TiO₂介晶不仅可以承载大量钌联吡啶，而且可以加速激发态钌联吡啶的产生从而促进核/壳状量子点的共振能量转移；富含辣根过氧化物酶的Envision复合物作为免疫传感平台可以承载大量信号探针，同时催化H₂O₂产生活性氧化物种，促进核/壳状量子点发光。ECL‑RET免疫传感器，具有灵敏度高、检测限低等优点，用于卵巢癌标记物，脂多糖刺激脂蛋白受体的检测，在早期卵巢癌诊断和监控方面具有较为重要的价值。

技术领域

本发明属于新型功能材料与免疫传感检测技术领域，具体涉及一种基于TiO₂介晶诱导的共振能量转移型电致化学发光及其对卵巢癌标记物的免疫传感方法及应用。

背景技术

电致化学发光(ECL)是由电化学反应引起的化学发光，因其灵敏度高、反应可控性强、仪器设备简单等优点引起了广泛的关注。共振能量转移是一种新兴的分子光谱分析方法，具体是指电子激发能在适当的能量供体和能量受体对之间的传递。而电致化学发光-共振能量转移(ECL-RET)结合了两者的优点，是一个很具有发展潜力的新领域。它既不需要激发光源，背景噪音较小，也避免了散射光的影响，己广泛地应用于生物传感器的构建。本发明制备了一种基于锐钛矿TiO₂介晶诱导的增强型电致化学发光-共振能量转移对新型卵巢癌标记物的免疫传感器，实现对卵巢癌新型标记物的高灵敏检测。

TiO₂纳米材料因其独特的光催化活性、无毒性，优异的化学和物理稳定性，使其成为光催化和光电化学传感器的理想材料，其性能一般受晶型、晶粒大小、晶面、结晶度、比表面积、微结构等的影响。TiO₂介晶是晶体亚单元有序排列而成，相比于传统的TiO₂单晶，TiO₂介晶具有更加高度的结晶形态及更加优良的光催化活性等性能。Envision复合物是一种由许多抗体和辣根过氧化物酶(HRP)偶联到右旋糖酐骨架上的新型聚合物，表面具有较多的活性位点，并且表现出良好的催化性能，在构建良好的电化学传感器中得到了广泛关注。本发明基于锐钛矿TiO₂介晶（CAMs）和Envision复合物，分别引入钌联吡啶及核/壳量子点（CdZnSe/ZnSe QDs）作为能量供体/受体对，制备一种锐钛矿TiO₂介晶（CAMs）诱导的ECL-RET免疫传感器，用于卵巢癌标记物（LSR）的检测。具有较高孔隙率的锐钛矿TiO₂介晶（CAMs）不仅可以承载大量钌联吡啶，而且可以加速激发态钌联吡啶的产生从而促进CdZnSe/ZnSe QDs的ECL-RET；富含辣根过氧化物酶的Envision复合物作为免疫传感平台可以承载大量信号探针，同时催化微量过氧化氢（H₂O₂）产生活性氧化物种（ROS），促进CdZnSe/ZnSe QDs发光。因此，所制得的ECL-RET免疫传感器，具有灵敏度高、检测限低等优点，用于卵巢癌标记物（LSR）的检测，在早期卵巢癌诊断和监控方面具有非常重要的价值。

发明内容

本发明的目的之一是基于锐钛矿TiO₂介晶（CAMs）和Envision复合物作为传感平台，钌联吡啶（Ru(bpy)₃²⁺）和核/壳状量子点（CdZnSe/ZnSe QDs）作为能量供体/受体对，构建一种稳定性好，灵敏度高的电致化学发光-共振能量转移免疫传感器。

本发明的目的之二是将该电致化学发光免疫传感器应用于卵巢癌新型标记物（LSR）的高灵敏检测。

为实现发明目的，本发明采用如下技术方案：

1. 一种基于TiO₂介晶诱导的共振能量转移型电致化学发光及其对卵巢癌标记物的免疫传感器的制备方法，其特在于，包括以下步骤：