[发明专利]液相色谱测定苯并噁嗪利福霉素的方法

权利要求书

1.一种利用液相色谱对利福平合成过程中产生的中间体苯并噁嗪利福霉素定量分析的方法，所述合成为以利福霉素S为原料通过环合和缩合反应合成利福平，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

步骤一、标准溶液配制

将苯并噁嗪利福霉素标准物质用乙腈溶解，用缓冲液定容，然后用微孔滤膜过滤除杂，收集滤液，得到苯并噁嗪利福霉素标准溶液；

步骤二、对环合反应液进行处理：

将含苯并噁嗪利福霉素的环合反应后的产物加入到醋酸溶液中搅拌分散，抽滤，获得固体产物苯并噁嗪利福霉素，烘干后，用乙腈溶解，用缓冲液定容，然后用微孔滤膜过滤除杂，得到液相色谱检测样品；

所述步骤中的缓冲液为乙腈和磷酸二氢钾混合溶液、甲醇和磷酸二氢钾混合溶液或乙腈和醋酸钠混合溶液；醋酸的质量分数为0.45％～0.9％，微孔滤膜的孔径为0.45μm；

步骤三、标准曲线绘制

对步骤一所得标准溶液进行液相色谱分析，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线；

步骤四、苯并噁嗪利福霉素含量测定

将步骤二所得的液相色谱检测样品用液相色谱分析，测得所述样品中苯并噁嗪利福霉素的峰面积，对比标准曲线，计算出利福平合成中间体苯并噁嗪利福霉素的含量；

所述步骤中色谱条件为：

色谱柱：Kromasil 100 C8,5μm,150mm×4.6mm

柱温：25℃

柱压：97.60bar

泵模式：等度

流动相：甲醇:乙腈:磷酸二氢钾溶液或醋酸钠溶液:柠檬酸溶液按体积比为30:30:6:4配制的混合溶液

流速：1.0mL/min

进样量：20μL

检测器：UV紫外检测器

检测波长：275nm

运行时间：35min。