[发明专利]引物、cDNA、载体、AQP4单克隆抗体及制备方法在审
| 申请号： | 201810893757.6 | 申请日： | 2018-08-08 |
| 公开（公告）号： | CN108998450A | 公开（公告）日： | 2018-12-14 |
| 发明（设计）人： | 武研;钟莲梅;耿嘉;吴倩;雷小光 | 申请（专利权）人： | 昆明医科大学第一附属医院 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/12;C12N15/85;C12N5/10;C07K16/18 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 650032 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物 制备 视神经脊髓炎 单克隆抗体 大鼠 小鼠 逆转录聚合酶链反应 克隆 中枢神经系统 大鼠大脑 高亲和力 体外诱发 总RNA 测序 位点 病变 治疗 探索 研究 | ||
【权利要求书】：
1.一种引物，其特征在于，所述引物的序列为SEQ ID NO：1。
2.一种使用权利要求1所述引物编码的大鼠AQP4 m23cDNA。
3.一种利用权利要求2所述大鼠AQP4 m23cDNA的perres 2-egfp载体，其特征在于，所述大鼠AQP4 m23cDNA插入到perres 2-egfp载体的NheI及SacII位点中。
4.一种包含权利要求3所述perres 2-egfp载体表达大鼠AQP4的CHO细胞克隆。
5.一种由权利要求4所述CHO细胞克隆得到的AQP4单克隆抗体。
6.一种如权利要求5所述AQP4单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述AQP4单克隆抗体的制备方法包括：在小鼠AQP4M23异构体或在D系列的人类AQP4m23异构体的cDNA片段被插入到pruebac4.5载体，以生产含有mAQP4或hAQP4的巴氏杆状病毒；在e系列中使用AQP4敲除小鼠作为宿主，或者在d系列中使用野生型小鼠；小鼠在腹腔内用含bv的磷酸盐缓冲盐溶液进行免疫，巴氏杆状病毒表达mAQP4-m23或hAQP4-m23同位素和百日咳毒素。流式细胞术和细胞测定法用于筛选AQP4抗体的亲和性。
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