[发明专利]一种低温高效使用循环酶法的二氧化碳试剂盒

说明书

本发明涉及体外诊断领域，具体是一种低温高效使用循环酶法的二氧化碳试剂盒。所述试剂盒由NADH类似物循环再生系统和二氧化碳测定试剂组成，NADH类似物循环再生系统由6‑磷酸‑果糖脱氢酶5‑50U/L、己糖激酶50‑500U/L、果糖1‑5g/L、腺嘌呤核苷三磷酸二钠盐0.5‑2.5g/L组成，二氧化碳测定试剂由Tris‑盐酸0.1mol/L(pH＝8)、稳定剂1g/L、草酰乙酸0.3g/L、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶0.1g/L、磷酸烯醇式丙酮酸钾0.6g/L、低温苹果酸脱氢酶0.05g/L、Triton‑100 1g/L组成。本发明二氧化碳测定试剂盒可在较低温度下使用，检测高盐样品中的二氧化碳浓度。

技术领域

本发明涉及体外诊断领域，具体是一种低温高效使用循环酶法的二氧化碳试剂盒。

背景技术

血液中的CO₂是判断人体内酸碱代谢情况的常用指标，其监测为酸碱平衡紊乱性疾病的进程和疗效判断提供了重要的依据，是不可缺少的急诊项目之一。血清总二氧化碳测定临床多为滴定法和离子选择电极法(ISE)。其中酶法测定T-CO₂，试剂打开使用后易吸收空气中的二氧化碳导致试剂中的NADH类物质被氧化失效，电极法一般与电解质分析仪组合在一起，CO₂电极膜需定期更换。酶法中均使用NADH类物质作为反应标定物，由于空气中二氧化碳的存在易致使二氧化碳测定试剂盒缺乏稳定性，保存时间短，直接影响临床使用。酶法测定的建立极大方便了临床检验，尤其是其适用于全自动生化分析仪，大大提高了分析速度，有利于数据管理。

目前关于二氧化碳测定试剂NADH类似物循环再生系统的报道非常有限。成本昂贵、稳定性差、测定范围局限是目前CO₂诊断试剂盒的主要问题。因此，研究一种配制简单、成本低廉、针对二氧化碳测定试剂盒有稳定效果且测定范围广泛的NADH类似物循环再生系统，具有相当的市场价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种低温高效使用循环酶法的二氧化碳试剂盒。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案是：

一种低温高效使用循环酶法的二氧化碳试剂盒，所述试剂盒由NADH类似物循环再生系统和二氧化碳测定试剂组成，NADH类似物循环再生系统由6-磷酸-果糖脱氢酶、己糖激酶、果糖、腺嘌呤核苷三磷酸二钠盐组成；二氧化碳测定试剂由Tris-盐酸(pH＝8)、稳定剂、草酰乙酸、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸钾、低温苹果酸脱氢酶、Triton-100组成；其中，6-磷酸-果糖脱氢酶来源于海洋低温产甘油假丝酵母(Candida glycerol)、己糖激酶来源于海洋低温短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶来源于海洋低温谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)，低温苹果酸脱氢酶来源于胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)和粘性沙雷氏菌(Serratia marcescens)。

上述一种低温高效使用循环酶法的二氧化碳试剂盒，其中，NADH类似物循环再生系统由6-磷酸-果糖脱氢酶5-50U/L、己糖激酶50-500U/L、果糖1-5g/L、腺嘌呤核苷三磷酸二钠盐0.5-2.5g/L组成，二氧化碳测定试剂由Tris-盐酸0.1mol/L(pH＝8)、稳定剂1g/L、草酰乙酸0.3g/L、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶0.1g/L、磷酸烯醇式丙酮酸钾0.6g/L、苹果酸脱氢酶0.05g/L、Triton-100 1g/L组成。

上述一种低温高效使用循环酶法的二氧化碳试剂盒，其中，NADH类似物循环再生系统由6-磷酸-果糖糖脱氢酶10U/L、己糖激酶100U/L、果糖1g/L、腺嘌呤核苷三磷酸二钠盐0.5g/L组成；二氧化碳测定试剂由Tris-盐酸0.1mol/L(pH＝8)、稳定剂1g/L、草酰乙酸0.3g/L、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶0.1g/L、磷酸烯醇式丙酮酸钾0.6g/L、苹果酸脱氢酶0.05g/L、Triton-1001g/L组成。