[发明专利]基于荧光定量PCR的茶树基因CsTTG1表达特征分析方法在审

专利信息
申请号: 201810896179.1 申请日: 2018-08-08
公开(公告)号: CN108950048A 公开(公告)日: 2018-12-07
发明(设计)人: 孙彬妹;代风玲;刘任坚;刘少群;肖熙 申请(专利权)人: 华南农业大学
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12Q1/6851
代理公司: 广州市时代知识产权代理事务所(普通合伙) 44438 代理人: 卢浩
地址: 510642 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 茶树 基因 荧光定量PCR 特征分析 反转录产物 基因组RNA 测序检测 特异性强 反转录 灵敏度 检测 内参 分析
【说明书】:

发明提供一种基于荧光定量PCR的茶树基因CsTTG1表达特征分析方法,其特征在于,包含以下步骤:S1.获取待测基因组RNA;S2.将RNA反转录为cDNA;S3.以反转录产物cDNA为模板,以Acting基因作为内参,通过PCR扩增引物进行PCR扩增;S4.对PCR扩增的产物进行测序检测分析。本发明能够对于茶树基因CsTTG1表达特征的特异性强,检测准确,灵敏度高,简便快速的优点,具有良好的检测能力。

技术领域

本发明属于生物技术领域,具体涉及一种基于荧光定量PCR的茶树基因CsTTG1表达特征分析方法。

背景技术

茶树嫩梢上的茸毛是茶树的一种优良特性。茸毛含有丰富的咖啡碱、氨基酸、茶多酚、黄酮类物质等成分,其生化特性很大程度影响茶叶的口感品质。随着生活质量的提高,人们对健康的饮茶生活越发注重,茶叶消费已超越感官享受,抗癌、抗氧化、降压等功能更受市场消费者的喜爱。茶叶茸毛中所含的茶多酚、咖啡碱和氨基酸等主要内含物赋予了茶叶更多保健功效及多样性的口感,如苦味、涩味和甜味。在早春时期采摘的茶叶被认为品质极佳,主要因其含有较多的茸毛,茸毛越多,茶叶越嫩,成茶的品质越好,因此茶叶中茸毛对其品质特征的形成具有明显的影响作用,被认为是一种重要的性状。目前国内外对茶树茸毛的研究仅停留在生化特性上,没有对调控茶树茸毛的相关基因进行深入研究,主要集中在拟南芥、甘蓝型油菜等植物中,因此探讨调控茶树茸毛形成发育的分子机理,对开展茶树育种有着深远的意义。

现有技术中对于茶叶“紫娟”的转录组进行测序,发现茶树中和调控拟南芥表皮毛生长发育相关的同源基因AtTTG1表达模式相关,并命名为CsTTG1。通过试验验证了CsTTG1基因的表达模式与茸毛发育具有一定的关系,可基于此对不同品种间茸毛密度分布特征的研究。

发明内容

有鉴于此,本发明提供一种基于荧光定量PCR的茶树基因CsTTG1表达特征分析方法,本发明能够对于茶树基因CsTTG1表达特征的特异性强,检测准确,灵敏度高,简便快速的优点,具有良好的检测能力。

本发明的技术方案为:一种基于荧光定量PCR的茶树基因CsTTG1表达特征分析方法,其特征在于,包含以下步骤:

S1.获取待测基因组RNA;

S2.将RNA反转录为cDNA;

S3.以反转录产物cDNA为模板,以Acting基因作为内参,通过PCR扩增引物进行PCR扩增;

S4.对PCR扩增的产物进行测序检测分析。

进一步的,所述待测基因组为CsTTG1基因组。所述的CsTTG1基因核苷酸序列为:

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