[发明专利]一种维生素D代谢物的检测方法在审
申请号: | 201810903260.8 | 申请日: | 2018-08-09 |
公开(公告)号: | CN110824025A | 公开(公告)日: | 2020-02-21 |
发明(设计)人: | 李金蓉;杨文初;许萍;阮亮亮;甘荣兴 | 申请(专利权)人: | 上海医药临床研究中心;上海枫林医药医学检验有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72 |
代理公司: | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人: | 沈其梅 |
地址: | 200231 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 维生素 代谢物 检测 方法 | ||
1.一种维生素D代谢物的检测方法,其特征在于,所述方法包括步骤:以有机溶剂萃取血清样品中分析物,即维生素D代谢物;在吹干的萃取剩余物中加入衍生试剂4-苯基脲唑和二乙酰氧基碘苯以发生狄尔斯阿尔德反应。
2.如权利要求1维生素D代谢物的检测方法,其特征在于,所述有机溶剂为甲基叔丁基醚、丙酮、正己烷或乙酸乙酯。
3.如权利要求1所述维生素D代谢物的检测方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
(1)以有机溶剂萃取血清样品中分析物,即维生素D代谢物;
(2)在吹干的萃取剩余物中加入衍生试剂4-苯基脲唑和二乙酰氧基碘苯以发生狄尔斯阿尔德反应,充分反应之后终止反应,生成衍生化的目标分析物;
(3)配制定量用的校正标准溶液和质控品;
(4)用液相色谱-串联质谱法检测维生素D代谢物。
4.如权利要求3所述维生素D代谢物的检测方法,其特征在于,所述步骤(3)中采用代替基质配置定量用的校正标准溶液和质控品,所述代替基质为pH 6-7的溶液。
5.如权利要求3所述维生素D代谢物的检测方法,其特征在于,所述pH 6-7的溶液为二次蒸馏水或5-10%牛血清白蛋白的生理盐水溶液。
6.如权利要求3所述维生素D代谢物的检测方法,其特征在于,所述代替基质为7-8%的牛血清白蛋白的生理盐水溶液。
7.如权利要求3所述维生素D代谢物的检测方法,其特征在于,所述代替基质组分为牛血清白蛋白和生理盐水,二者质量比为8:100。
8.如权利要求1-7任一权利要求所述维生素D代谢物的检测方法,其特征在于,所述衍生试剂的添加顺序为先加二乙酰氧基碘苯,再加4-苯基脲唑。
9.如权利要求1-7任一权利要求所述维生素D代谢物的检测方法,其特征在于,所述有机溶剂为甲基叔丁基醚、丙酮、正己烷或乙酸乙酯。
10.如权利要求9所述维生素D代谢物的检测方法,其特征在于,所述衍生试剂的添加顺序为先加二乙酰氧基碘苯,再加4-苯基脲唑;所述步骤(2)中添加去离子水来终止狄尔斯阿尔德反应。
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