[发明专利]一种即用型3D细胞生长支架及其制备方法在审
| 申请号： | 201810903626.1 | 申请日： | 2018-08-09 |
| 公开（公告）号： | CN108977405A | 公开（公告）日： | 2018-12-11 |
| 发明（设计）人： | 余玲;周莹;付晶晶;王林祥 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12N5/00 | 分类号： | C12N5/00 |
| 代理公司： | 重庆知创恒源知识产权代理事务所(普通合伙) 50227 | 代理人： | 廖曦 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞生长 支架 制备 细胞培养 大规模工业化生产 细胞培养技术 真空冷冻干燥 细胞外基质 长期保存 均匀覆盖 生长环境 实验操作 支架制备 交联剂 烘干 基底 洗涤 浸泡 三维 | ||
1.一种即用型3D细胞生长支架的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：将细胞外基质溶液均匀覆盖在基底上，于-80℃下静置4-12h，然后真空冷冻干燥24-36h后置于交联剂中浸泡12-24h，洗涤、烘干，制得即用型3D细胞生长支架。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述基底的厚度为10-40μm，孔隙率为23-39％，平均孔径为36-280μm时，所述细胞外基质溶液的质量分数为5-25％。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述细胞外基质溶液为明胶溶液、胶原溶液、海藻酸钠溶液、胶原蛋白溶液、粘连蛋白溶液、PLA溶液或丝素蛋白溶液中的一种。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述基底为无纺布、擦镜纸、纱布或滤纸中的一种。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述真空冷冻干燥在真空度为0.001mbar，温度为-80℃的条件下进行。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述交联剂由如下方法制得：向pH值为4.75、体积分数为80％的乙醇溶液中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺至1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的终浓度为50mmol/L、N-羟基琥珀酰亚胺的终浓度为10mmol/L。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述交联剂由如下方法制得：将戊二醛溶于水中制得体积分数为25％的戊二醛水溶液。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述烘干具体为在50-60℃烘干2-4h。
9.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于，所述细胞外基质溶液中还包含有表皮细胞生长因子或T细胞生长因子中的一种。
10.权利要求1-9任一项所述的方法制备的即用型3D细胞生长支架。
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