[发明专利]一种获得高含量甘油葡萄糖苷藻细胞的养殖方法有效
申请号: | 201810908060.1 | 申请日: | 2018-08-10 |
公开(公告)号: | CN108977402B | 公开(公告)日: | 2021-01-01 |
发明(设计)人: | 吕雪峰;段仰凯;张凯;吴怀之;刘祥 | 申请(专利权)人: | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
主分类号: | C12N1/38 | 分类号: | C12N1/38;C12N1/20;C12P19/44 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 董洁 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 获得 含量 甘油 葡萄 糖苷 细胞 养殖 方法 | ||
1.一种获得高含量甘油葡萄糖苷螺旋藻细胞的养殖方法,其特征是,该方法使用的反应器为100L管式反应器,该方法包括以下步骤:
(1)获得培养后的藻细胞阶段:
将该藻细胞接种于淡水培养基中,初始接种浓度为0.15g/L,控制培养该藻细胞的淡水培养基的温度程序为:恒温28℃,光照程序为:持续光照,光照强度为200μE·m-2·s-1,光波长范围为400~700nm,通气量为:0.2VVM,所通入的气体为含有二氧化碳的混合空气,二氧化碳体积浓度为2%,以及向培养基中加入100mmol NaHCO3;
此阶段的培养时间为3-5天;
其中,所述淡水培养基的具体配方为:Zarrouk培养基;
(2)GG生成阶段:
藻细胞选用上述步骤(1)培养后成长起来的细胞,控制培养该藻细胞的淡水培养基的温度程序为:光照时温度32℃,黑暗时温度23℃,光照程序为:光暗比为1:1,光暗时长分别为12小时和12小时,光强600μE·m-2·s-1,光波长范围为400~700nm,通气量为:0.2VVM,所通入的气体为含有二氧化碳的混合空气,二氧化碳体积浓度为5%;
其中,所述淡水培养基为步骤(1)中的淡水培养基中加入氯化钠,使其在淡水培养基中的浓度为150mmol/L;
此阶段的培养时间为3-5天;
(3)GG拔高阶段一:
该阶段的藻细胞特征是经过步骤(2)培养后已经含有一定量的GG,此阶段的培养条件与步骤(2)的基本相同,区别在于:淡水培养基为步骤(2)中的淡水培养基中继续加入氯化钠,使其在淡水培养基中的浓度为500mmol/L;
此阶段的培养时间为3天;
通过步骤(3)培养后,经检测,可以获得GG质量含量10%以上的藻细胞;
(4)GG拔高阶段二:
对于自养型微藻-螺旋藻,选用与步骤(3)相同培养条件,区别在于:将步骤(3)获得的微藻细胞接入步骤(4)的新鲜培养基,所述新鲜培养基为含有900mmol氯化钠的Zarrouk培养基;
此阶段的培养时间为3天。
2.一种甘油葡萄糖苷的制备方法,其特征是:该方法包括权利要求1所述的获得高含量甘油葡萄糖苷螺旋藻细胞的养殖方法。
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