[发明专利]细胞上清的总蛋白定量检测试剂盒及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 201810914869.5 | 申请日： | 2018-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN109239352A | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 王培培;沈丽;邓钺;黄庆雷 | 申请（专利权）人： | 北京弘润天源基因生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/543;G01N33/531;G01N21/78 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;任凤华 |
| 地址： | 100085 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酶标板 包被 制备 标准品 总蛋白 定量检测试剂盒 细胞培养上清液 牛血清白蛋白 蛋白质 磷酸缓冲盐溶液 考马斯亮蓝 生物化妆品 细胞 检测液体 抗体制备 细胞产生 分泌物 试剂盒 用溶剂 溶剂 可用 应用 灵敏 中药 刺激 检测 | ||
1.用于测定细胞培养上清液中的蛋白质含量的试剂盒,包括标准品包被的酶标板和考马斯亮蓝G250染色液，所述标准品包被的酶标板按照包括下述步骤的方法制备：将牛血清白蛋白用溶剂配制成牛血清白蛋白浓度不同的N种溶液，将所述N种溶液均分别加入酶标板的不同孔内，包被所述酶标板，得到标准品包被的酶标板；所述N为大于等于8的自然数；所述溶剂为pH值为7.4的磷酸缓冲盐溶液。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述pH值为7.4的磷酸缓冲盐溶液是将磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠和氯化钾溶于水中得到的磷酸二氢钾浓度为1.76mmol/L、磷酸氢二钠浓度为25.5mmol/L、氯化钠浓度为137mmol/L和氯化钾浓度为2.7mmol/L的溶液。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述N种溶液为牛血清白蛋白浓度分别为0mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml和4.0mg/ml的溶液。
4.制备权利要求1-3中任一所述的试剂盒的方法，包括如下制备标准品包被的酶标板的步骤：将牛血清白蛋白用溶剂配置成牛血清白蛋白浓度不同的N种溶液，将所述N种溶液均分别加入酶标板的不同孔内，包被所述酶标板，得到标准品包被的酶标板；所述N为大于等于8的自然数；所述溶剂为pH值为7.4的磷酸缓冲盐溶液。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述pH值为7.4的磷酸缓冲盐溶液是将磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠和氯化钾溶于水中得到的磷酸二氢钾浓度为1.76mmol/L、磷酸氢二钠浓度为25.5mmol/L、氯化钠浓度为137mmol/L和氯化钾浓度为2.7mmol/L的溶液。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述N种溶液为牛血清白蛋白浓度分别为0mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml和4.0mg/ml的溶液。
7.根据权利要求4或5或6所述的方法，其特征在于：所述方法还包括将考马斯亮蓝G250染色液和所述标准品包被的酶标板单独包装后装入试剂盒得到用于测定细胞培养上清液中的蛋白质含量的试剂盒的步骤。
8.权利要求1-3中任一权利要求所述的试剂盒在检测细胞培养上清液中的蛋白质含量中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述检测细胞培养上清液中的蛋白质含量为检测细胞培养上清液中的总蛋白质含量。
10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于：所述细胞为动物细胞、植物细胞或微生物细胞。
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