[发明专利]一种金心阿尔塔冬青的快速繁殖方法

权利要求书

1.一种金心阿尔塔冬青的快速繁殖方法，其特征在于包括如下步骤：

1)一个选择外植体的步骤，于每年3-4月间，剪取无病虫害、粗壮的当年生金心阿尔塔冬青的枝条作为外植体，去掉植物叶片；

2)一个消毒的步骤，将所述的枝条茎干表面清洗干净，用质量百分比浓度为5% 的84消毒液浸泡8~12分钟，再用流水冲洗3-5h；然后在超净工作台上先将枝条截成1.5-2.0cm的带芽茎段，再用质量百分比浓度为75%的酒精浸泡20~30s，无菌水冲洗1次，最后用质量百分比浓度为0.1%的升汞消毒8-12min，再用无菌水冲洗4~8次；

3)一个初代培养的步骤，将上述已消毒的外植体接种到初代培养基中，每瓶初代培养基接一个已消毒的外植体进行培养，15-20天后腋芽开始生长，所述的接种培养基的基础培养基为MS培养基，在所述的MS培养基中还添加有6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，所述的6-苄氨基腺嘌呤在培养基中的浓度为1.5-2.0 mg/L，所述的萘乙酸在培养基中的浓度为0.5 mg /L；

4)一个继代培养的步骤，当初代培养基上的腋芽萌发长到3-5cm以后，将腋芽从外植体上剪切下来，截成1.0～1.5 cm的茎段，转接到诱导培养基中进行增殖培养，诱导培养基的基础培养基为MS培养基，在所述的MS培养基中还添加有6-苄氨基腺嘌呤、6-糠氨基嘌呤和吲哚丁酸，所述的6-苄氨基腺嘌呤在诱导培养基中的浓度为2.0-3.0mg/L，所述的6-糠氨基嘌呤在诱导培养基中的浓度为0.5 mg/L，所述的吲哚丁酸在诱导培养基中的浓度为0.5mg/L，18~22天不定芽分化，然后诱导产生丛生芽，增殖系数为5.0～8.0；继代3-5次后，转入壮苗培养基中进行培养，所述的壮苗培养基的基础培养基为MS培养基，在所述的MS培养基中还添加有6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，所述的6-苄氨基腺嘌呤在壮苗培养基中的浓度为1.0-1.5 mg/L，所述的萘乙酸在壮苗培养基中的浓度为0.5 mg/L；

5)一个生根培养的步骤，选择步骤4）获得的叶长3~6cm、具有2~5片叶的健壮不定芽，转入生根培养基中，所述的生根培养基的基础培养基为1/2MS培养基，在1/2MS培养基中还添加有吲哚丁酸、萘乙酸，所述的吲哚丁酸在生根培养基中的浓度为0.2 mg/L，所述的萘乙酸在生根培养基中的浓度为0.05-0.1 mg/L，15-20天生根，当根生长到1.0-2.0cm时，进行炼苗移栽；

6)一个炼苗移栽的步骤，将步骤5）获得的幼苗先在自然条件下炼苗4~10天，然后将炼苗完成的小苗从培养瓶中取出，洗净小苗根部附着的培养基，再用1000ppm的适乐时溶液浸根3~8min，取出后移栽至栽培介质中，所述的栽培介质由草炭、珍珠岩、蛭石组成，所述的草炭、珍珠岩、蛭石的质量比为3:1:1，用塑料薄膜覆盖保湿，相对湿度控制在70-80%，移栽期间遮阴40~60%，温度控制在15-25℃，完成金心阿尔塔冬青的快速繁殖。

2.根据权利要求1所述的一种金心阿尔塔冬青的快速繁殖方法，其特征在于：在步骤3）、步骤4）的MS培养基中还添加有琼脂和蔗糖，所述的琼脂在培养基中的浓度为7g/L，所述的蔗糖在培养基中的浓度为30g/L，所述的培养基的PH值在5.8-5.9之间。

3.根据权利要求1所述的一种金心阿尔塔冬青的快速繁殖方法，其特征在于：在初代培养、继代培养和生根培养的步骤中，培养的温度为23±2℃，14~16h/d的光周期，光照强度为1800~2200Lux。