[发明专利]一种金心阿尔塔冬青的快速繁殖方法

说明书

本发明提供了一种金心阿尔塔冬青的快速繁殖方法，先剪取无病虫害、粗壮的当年生枝条作为外植体，对外植体进行消毒，接种到初代培养基中培养；培养15‑20天，腋芽开始萌发，长到3‑5cm以后从外植体上剪切下来，转接到不定芽诱导培养基中；继代3‑5次后，转入壮苗培养基中培养；继代培养得到叶长3~6cm、具有2~5片叶的健壮小苗，转接入生根培养基中培养；根生长到1.0‑2.0cm出苗时进行炼苗移栽。本发明可提高金心阿尔塔冬青的苗木增殖系数，达到5.0‑8.0，成活率70‑75%，解决了金心阿尔塔冬青苗木市场短缺和缩短育种周期的问题。

技术领域

本发明涉及农业领域，尤其涉及植物的组织培养技术，特别是一种金心阿尔塔冬青的快速繁殖方法。

背景技术

金心阿尔塔冬青I×altaclerensis‘Lawsoniana’为冬青科冬青属植物，为雌株。常绿灌木，株型紧凑，茎有黄色条纹；叶中央有金色和绿色斑纹，背面浅绿色，叶质坚而光亮；果红褐色，冬季挂果期长，具有很好的观赏价值。近几年，我国从国外引进了多种花叶类冬青，由于冬青属植物种子萌发率低(徐本美等1997)、扦插生根比较困难(孙晶等2005)，主要采用嫁接方式繁殖苗木，成本较高，在一定程度上制约了其园林中的应用。对金心阿尔塔冬青进行组培快繁，可为花叶类冬青的快繁提供参考依据，同时也可促进该属植物在园林绿化中推广应用，实现其经济价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种金心阿尔塔冬青的快速繁殖的方法，所述的这种金心阿尔塔冬青的快速繁殖的方法解决了现有技术中的金心叶阿尔塔冬青繁殖速度慢的技术问题。

一种金心阿尔塔冬青的快速繁殖方法，其特征在于包括如下步骤：

1)一个选择外植体的步骤，于每年3-4月间，剪取无病虫害、粗壮的当年生金心阿尔塔冬青的枝条作为外植体，去掉植物叶片；

2)一个消毒的步骤，将植物茎干表面清洗干净，用质量百分比浓度为5％的84 消毒液浸泡8～12分钟，再用流水冲洗3-5h；然后在超净工作台上先将枝条截成1.5-2.0cm的带芽茎段，用质量百分比浓度为75％的酒精浸泡20～30s，无菌水冲洗1次，最后用质量百分比浓度为0.1％的升汞消毒8-12min，再用无菌水冲洗4～8次；

3)一个初代培养的步骤，将上述已消毒的外植体接种到初代培养基中，每瓶初代培养基接一个已消毒的外植体进行培养，15-20天后腋芽开始生长，所述的接种培养基的基础培养基为MS培养基，在所述的MS培养基中还添加有 6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，所述的6-苄氨基腺嘌呤在培养基中的浓度为 1.5-2.0mg/L，所述的萘乙酸在培养基中的浓度为0.5mg/L；

4)一个继代培养的步骤，当初代培养基上的腋芽萌发长到3-5cm以后，将腋芽从外植体上剪切下来，截成1.0～1.5cm的茎段，转接到诱导培养基中进行增殖培养，诱导培养基的基础培养基为MS培养基，在所述的MS培养基中还添加有6-苄氨基腺嘌呤、6-糠氨基嘌呤和吲哚丁酸，所述的6-苄氨基腺嘌呤在诱导培养基中的浓度为2.0-3.0mg/L，所述的6-糠氨基嘌呤在诱导培养基中的浓度为0.5mg/L，所述的吲哚丁酸在诱导培养基中的浓度为0.5mg/L， 18～22天不定芽分化，然后诱导产生丛生芽，增殖系数为5.0～8.0；继代3-5 次后，转入壮苗培养基中进行培养，所述的壮苗培养基的基础培养基为MS 培养基，在所述的MS培养基中还添加有6-苄氨基腺嘌呤和萘乙酸，所述的 6-苄氨基腺嘌呤在壮苗培养基中的浓度为1.0-1.5mg/L，所述的萘乙酸在壮苗培养基中的浓度为0.5mg/L；

5)一个生根培养的步骤，选择步骤4)获得的叶长3～6cm、具有2～5片叶的健壮不定芽，转入生根培养基中，所述的生根培养基的基础培养基为1/2MS培养基，在1/2MS培养基中还添加有吲哚丁酸、萘乙酸，所述的吲哚丁酸在生根培养基中的浓度为0.2mg/L，所述的萘乙酸在生根培养基中的浓度为 0.05-0.1mg/L，15-20天生根，当根生长到1.0-2.0cm时，进行炼苗移栽；