[发明专利]一种低免疫原性、可诱导凋亡的IPS细胞制备方法在审
申请号: | 201810916134.6 | 申请日: | 2018-08-13 |
公开(公告)号: | CN108998419A | 公开(公告)日: | 2018-12-14 |
发明(设计)人: | 顾雨春;吴理达;尹乐;谭声江 | 申请(专利权)人: | 北京呈诺医学科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/62;C12N15/85;C12N15/867 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 温可睿;赵青朵 |
地址: | 101111 北京市大兴区北京经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 凋亡 受控 基因修饰 免疫原性 敲除 制备 单克隆细胞株 基因工程技术 免疫原性降低 细胞免疫原性 低免疫原性 融合蛋白 细胞保持 诱导凋亡 基因组 回输 修饰 分化 细胞 | ||
1.基因修饰的iPS细胞,其表达FKBP-Caspase9融合蛋白,且不表达B2M蛋白。
2.权利要求1所述iPS细胞的制备方法,其特征在于,采用Cas9技术敲除iPS细胞的B2M基因;采用慢病毒感染法或定点敲入技术使iPS细胞表达FKBP-Caspase9融合蛋白。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述B2M基因的敲除采用含有SEQ IDNO.1所示序列的载体。
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述FKBP-Caspase9融合蛋白表达基因的序列如SEQ ID NO.2所示。
5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述慢病毒感染法的慢病毒表达载体为pLenti-CMV/To-Neo。
6.靶向敲除iPS细胞B2M基因的Cas9/gRNA载体,其特征在于,含有SEQ ID NO.1所示的序列。
7.FKBP-Caspase9融合蛋白的慢病毒表达载体,其特征在于,含有SEQ ID NO.2所示的序列。
8.权利要求1的iPS细胞在制备用于细胞治疗的产品中的应用。
9.一种用于细胞治疗的产品,其特征在于,包含权利要求1所述的iPS细胞。
10.一种低致瘤风险的细胞治疗方法,其特征在于,
给予权利要求1所述的iPS细胞,当发生肿瘤化风险时给予AP1903。
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