[发明专利]一种花生壳发酵专用复合菌剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种花生壳发酵专用复合菌剂及其制备方法和应用，花生壳发酵专用复合菌剂包括复合菌体和辅料，所述复合菌体包括：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。本发明的花生壳发酵专用复合菌剂中，各种微生物间具有高度协同作用，能够形成稳定的生态系统，可以在未经灭菌的花生壳粉中快速生长繁殖，占据优势，迅速产生大量乳酸，降低发酵饲料pH值，改善饲料的发酵品质，提高饲料的营养价值和适口性。

技术领域

本发明涉及饲料加工领域，特别涉及一种花生壳发酵专用复合菌剂及其制 备方法和应用。

背景技术

我国花生壳资源非常丰富，2015年全国花生壳总产量为500万吨，可利用 量不足1/3，发展潜力很大。如何合理、充分开发利用花生壳，提高其中和利用 水平，受到国内外学者的重视。

目前，饲料及养殖行业人畜争粮的矛盾突出，大量秸秆资源没有的到合理 的开发利用。

传统上秸秆饲料转化主要是采用化学处理(氨化、碱化、酸化等)以及物 理处理等方式。然而化学试剂处理具有一定的腐蚀性，存在安全隐患；而物理 处理不能达到提到饲料营养的目的。微生物发酵技术是近年来应用较为广泛的 一种生物饲料转化技术。微生物发酵中大多采用单一菌剂或混合菌剂。单一菌 剂发酵中，容易受到有害菌的污染和抑制，发酵效果不佳。混合菌剂各微生物 菌体间协同作用需要待证实。

发明内容

为了解决现有技术的问题，本发明实施例提供了一种花生壳发酵专用复合 菌剂及其制备方法和应用。所述技术方案如下：

一方面，一种花生壳发酵专用复合菌剂，包括复合菌体和辅料，所述复合 菌体包括：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

进一步的，所述复合菌体中，植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌 和枯草芽孢杆菌的体积比为1:1:1:1。

进一步的，所述复合菌体和辅料的体积质量比为，复合菌体(体积)：辅料 (质量)＝5-10:1。

进一步的，所述辅料包括脱脂奶粉和乳糖。

另一方面，一种花生壳发酵专用复合菌剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)从-80℃超低温冰箱中，分别取植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳 杆菌和枯草芽孢杆菌，分别接种到2mL活化培养基中，过夜培养得到各菌株活 化培养液；

(2)将步骤(1)所述的各菌株活化培养液，按1％体积比的接种量分别接 种到对应的扩大培养基中，培养得各菌株种母培养液；

(3)将步骤(2)所述的各菌株种母培养液，按2-5％体积比的接种量分别 接种到对应的扩菌培养基中，分别培养至菌液在OD_600nm测得的值大于4，然后 分别离心，弃去上清液，重悬沉淀，分别得到植物乳杆菌菌体悬液、鼠李糖乳 杆菌菌体悬液、副干酪乳杆菌菌体悬液、枯草芽孢杆菌菌体悬液；

(4)将所述植物乳杆菌菌体悬液、鼠李糖乳杆菌菌体悬液、副干酪乳杆菌 菌体悬液、枯草芽孢杆菌菌体悬液混合后得到复合菌体，向所述复合菌体中添 加辅料混合均匀，冷冻干燥后得到所述花生壳发酵专用复合菌剂。

进一步的，步骤(1)中所述植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌使 用的活化培养基为MRS液体培养基，30-37℃培养12-16h；所述枯草芽孢杆菌 使用的活化培养基为LB液体培养基，30-37℃培养12-16h；