[发明专利]一种基于骨架蛋白的降解评价鱼肉新鲜度的方法

权利要求书

1.一种基于骨架蛋白的降解评价鱼肉新鲜度的方法，其特征在于：包括，利用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定不同贮藏天数下鱼肉样本的骨架蛋白的光密度值IOD；采用高效液相色谱法测定贮藏不同天数下鱼肉样本的三磷酸腺苷(ATP)降解产物浓度，计算出新鲜度指标K值，所述三磷酸腺苷降解产物为二磷酸腺苷、一磷酸腺苷、肌苷酸、次黄嘌呤、次黄嘌呤腺苷；结合所述光密度值IOD和所述K值，利用最小二乘支持向量机，建立鱼肉新鲜度指标K值的预测模型；

所述骨架蛋白为伴肌动蛋白、伴肌球蛋白和肌钙蛋白T；

所述计算出新鲜度指标K值，其中，K值的计算公式为：

其中，

ATP代表三磷酸腺苷浓度，ADP代表二磷酸腺苷浓度、AMP代表一磷酸腺苷浓度、IMP代表肌苷酸浓度、Hx代表次黄嘌呤浓度、HxR代表次黄嘌呤腺苷浓度；

所述鱼肉新鲜度指标K值的预测模型方程式为：Y_k＝C0+aX+bY+cZ其中，Y_k为新鲜度指标K值；X、Y、Z分别代表伴肌动蛋白、伴肌球蛋白、肌蛋白T的光密度值；C0、a、b、c均为常数；

所述聚丙烯酰胺凝胶电泳，其中，电泳缓冲液为，125mmol/L Tris-HCl(pH6.8)，2.4％SDS，50mmol/LDTT，10％甘油，0.5mmol/L EDTA。采用4％浓缩胶和10％分离胶进行SDS-PAGE电泳分析，电泳起始电压为90V，待样品进入分离胶后改为120V。

2.如权利要求1所述的基于骨架蛋白的降解评价鱼肉新鲜度的方法，其特征在于：所述鱼肉新鲜度指标K值的预测模型方程式的预测方根误差RMSEP＜0.025，预测决定系数R²＞0.9。