[发明专利]包裹和厚朴酚的阳离子脂质纳米颗粒及其制备和应用

说明书

本发明公开了一种包裹和厚朴酚的阳离子脂质纳米颗粒及其制备和应用，包括阳离子脂质体和疏水性药物和厚朴酚；所述阳离子脂质体具有阳离子双层磷脂膜，其内部是内水相，外部是外水相，阳离子双层磷脂膜之间的疏水区域包裹有疏水性药物和厚朴酚；其制备方法为将和厚朴酚、阳离子脂质和中性脂质分别溶解在溶剂中，然后旋转蒸发除去溶剂，最后加入去离子水，室温下超声，得稳定均一的包裹和厚朴酚的阳离子脂质纳米颗粒，可用于制备治疗血管损伤后再狭窄的药物。本发明的纳米颗粒主要通过阳离子脂质体与细胞膜的静电作用和DOPE的融膜作用顺利黏附到细胞表面，并顺利突破细胞膜将脂溶性药物高效输送入细胞，实现安全高效的药物输送。

技术领域

本发明涉及的是和厚朴酚纳米颗粒领域，具体涉及包裹和厚朴酚的阳离子脂质纳米颗粒及其制备和应用。

背景技术

目前，心血管疾病严重危害中老年人的健康。在美国，每年对心血管疾病的治疗中，其中超过百万需行血管重建术(文献1)。血管重建术后再狭窄是影响冠心病患者疗效和预后的重要因素，防治再狭窄仍然是心脏病学研究的焦点之一。当今临床应用治疗内膜过度增生的唯一方法是支架释放抗增生药物雷帕霉素或紫杉醇等(文献2、文献3)

药物洗脱支架显著降低再狭窄发生率，该技术迅速发展，其局限性更加明显，其包括，释放药物的支架会引起强烈的炎症反应以及抑制平滑肌细胞增殖的同时，也抑制了内皮细胞的再生，破坏了血管内皮细胞的完整性(文献4)。

和厚朴酚是常用传统中药厚朴的主要活性成分之一。和厚朴酚具有抗炎、抗增殖、抗血管生成等作用，自1994年发现和厚朴酚具有心血管保护功效以来，对其心血管保护机制和适宜剂量研究颇多，中等浓度和厚朴酚可以诱导血管平滑肌细胞的凋亡，高等浓度和厚朴酚可以抑制其增殖。但是其作用的分子机制尚不清楚，并且和厚朴酚具有极差的水溶性和易被氧化的理化特性阻碍了其在临床的应用。

近年来科学家们就和厚朴酚的水溶性差、利用率低、副作用高等缺陷研究了一系列的药物传递体；其一是高分子材料，纳米高分子材料载药系统主要是通过纳米粒子内部的溶解包裹作用或者纳米离子表面的吸附附着作用形成的纳米系统，但是必须保证纳米材料是无毒的，并且负载的药物必须保持或聚集在载药材料的指定位置(文献5)。高分子材料释药的可控性很差，研究存在巨大的挑战。其二是石墨烯、二氧化硅等新型材料，石墨烯污染环境严重还会切开人体细胞破坏其内容物，对人体具有一定的毒性，而且石墨烯材料生产受限价格昂贵，不利于大批次适用于科学研究；二氧化硅载药靠介孔结构的吸附作用，载药不稳定，药物及其容易从介孔结构中释放出来导致二氧化硅结构的崩解(文献6)。在此，我们发明了一种阳离子脂质体载和厚朴酚的纳米系统。

DOTAP是最常用的阳离子脂质体，但是如果单独形成脂质体，其稳定性和融膜性均较差，所以常需要添加辅助脂质。其中DOPE是最为常用的辅助脂质。DOTAP/DOPE装载的阳离子脂质体可以被动将和厚朴酚包载在其疏水区，阳离子脂质体利用其表面的电荷作用和细胞表面吸附，迅速定位到细胞膜并被摄取。本次发明的阳离子脂质体和厚朴酚系统可以稳定存在并且增加了和厚朴酚的水溶性，融膜作用强可以将和厚朴酚迅速输送入细胞，提高药物的药效，降低用药剂量和副作用，是一种发挥其本身优点并突破药物弊端的药物传递系统。

现有技术文献：

文献1：Shi X,Chen G,Guo L W等人.血管外膜应用雷帕霉素纳米颗粒抑制血管损伤后再狭窄[J].公共科学图书馆·综合,2014,9(2):e89227.

文献2：Seedial SM,Ghosh S,等人.局部用药抑制血管损伤后再狭窄.血管外科杂志.2013；57(5):1403–14.

文献3：Yang J,Zeng Y,Zhang C等人.VEGF基因和紫杉醇洗脱支架应用于体内预防血管损伤后再狭窄.[J].生物材料杂志,2013,34(6):1635-1643.