[发明专利]一种快速测定烟草中苯霜灵残留含量的方法

权利要求书

1.一种快速测定烟草中苯霜灵残留含量的方法，具体采用以下步骤：

(1)电化学传感器的制备

①石墨烯修饰丝网印刷电极

将2mg石墨烯分散于2mL超纯水中，超声1h得到均一的悬浮液备用；将丝网印刷电极置于超纯水中，超声清洗1h，取出晾干后，循环伏安扫描至出现明显氧化还原峰，再用0.05molL^-1硫酸纯化，纯化后用超纯水清洗掉硫酸，晾干；取5μL备用的石墨烯悬浮液滴涂于晾干的丝网印刷电极上，置于红外灯下15min，得到石墨烯修饰电极；

②分子印迹膜修饰丝网印刷电极

依次将0.0125mmol苯霜灵Ben、0.05mmol丙烯酰胺AM和0.75mmoL二甲基丙烯酸乙二醇酯EGDMA溶于0.5mL乙腈中，超声振荡5min后静置1h，使Ben与AM充分作用，加入0.24mmol偶氮二异丁腈AIBN，超声溶解后通氮气10min，得到预聚合液；取5μL预聚合液均匀涂在石墨烯修饰电极上，置于波长为365nm紫外灯下3h，取出冷却至室温，得到石墨烯修饰的苯霜灵分子印迹电化学传感器Ben-MIM/RGO/SPE；将Ben-MIM/RGO/SPE置于10mL甲醇/乙酸体积比为1:1的洗脱液中搅拌洗脱15min后，去除分子印迹膜中的苯霜灵分子，得到制备好的电化学传感器；

(2)待测样品溶液处理

称取1.0g待测烟草样品于25mL聚乙烯离心管中，加入10mL乙腈作为萃取液，超声10min，过滤后加入2g NaCl，静置待分层后，取上层乙腈层1.5mL加入试剂包净化，过滤得到待测样品溶液；所述的试剂包为150mg无水硫酸镁和25mg N-丙基乙二胺键合固相吸附剂的混合物；

(3)铁氰化钾缓冲液配制

称取0.1646g K₃Fe(CN)₆和0.7455g KCl，用水定容至100mL容量瓶中，得到铁氰化钾缓冲液；

(4)绘制标准工作曲线

用乙腈作为溶剂，配制苯霜灵储备液，移取苯霜灵储备液至10mL铁氰化钾缓冲液中，获得浓度为7.0×10^-9到6.8×10^-4范围内的系列标准工作液，绘制标准曲线；所得标准曲线分两段，响应电流△i与Ben的浓度c在7.0×10^-9～2.4×10^-7mol L^-1和2.4×10^-7～6.8×10^-4mol L^-1范围内，线性回归方程分别为△i＝0.7146+19.0143c，相关系数r²＝0.9976和△i＝5.5793+0.0140c，相关系数r²＝0.9968，c的单位为μmol L^-1；

(5)用电化学工作站进行分析

用CHI660型电化学工作站进行检测，采用三电极系统：步骤(1)所得的Ben-MIM/RGO/SPE电化学传感器为工作电极，铂电极为辅助电极，饱和甘汞电极SCE为参比电极；将三电极系统放入10mL铁氰化钾缓冲液中，平衡，待背景电流稳定后，进行循环伏安CV和差示脉冲DPV的测定；

CV测定条件：扫描范围为-0.2～0.6V，扫描速率为100mV/s；

DPV测定条件：扫描范围为-0.2～0.6V，扫描速率为100mV/s，电位增量为0.004V，振幅为0.05V，脉冲宽度为0.05s，采样宽度为0.016s；

(6)结果计算

以干基计的苯霜灵残留量R，以毫克每千克表示，按下式计算：

式中：

R—以干基计的苯霜灵残留量(mg Kg^-1)；

C—标准工作曲线计算得到的结果(μmol L^-1)；

V—萃取液体积(mL)；

M—苯霜灵的摩尔质量(g mol^-1)；

m—待测样品质量(g)。

2.根据权利要求1所述的快速测定烟草中苯霜灵残留含量的方法，其特征在于：步骤(5)中所述的平衡，时间为2min。