[发明专利]一种高效制备虾青素标品的方法在审
申请号: | 201810924978.5 | 申请日: | 2018-08-14 |
公开(公告)号: | CN108931601A | 公开(公告)日: | 2018-12-04 |
发明(设计)人: | 李纪丰;石英杰;陈今朝;赵佳;蒋海燕;足立胜 | 申请(专利权)人: | 威海利达生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/74 |
代理公司: | 北京志霖恒远知识产权代理事务所(普通合伙) 11435 | 代理人: | 孟阿妮 |
地址: | 264200 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 虾青素 标品 初级产物 高效制备 取上清液 上清液 提纯 菌泥 水浴 制备 沉淀 二甲基亚砜溶液 高效液相色谱仪 旋转蒸发仪 法夫酵母 溶液离心 整体步骤 重现性 甲醇 浸提 油状 发酵 环保 | ||
1.一种高效制备虾青素标品的方法,其特征在于:所述方法的整体步骤为:
步骤一、将发酵好的法夫酵母液在7000~10000rpm下离心5~10min,得到菌泥;
步骤二、向菌泥中加入不少于其10倍体积的二甲基亚砜溶液,然后在40~45℃下水浴20~35min,浸提虾青素;
步骤三、将步骤二中水浴处理好的溶液于7000~12000rpm下离心5~10min,弃沉淀取上清液;
步骤四、将上清液与等体积的甲醇混合均匀,并于7000~10000rpm下离心5~10min,继续弃沉淀取上清液;
步骤五、将步骤四中得到的上清液通过半制备高效液相色谱仪进行提纯,得到油状的初级产物;
步骤六、通过旋转蒸发仪对初级产物进行提纯,最终得到的产物即为虾青素标品。
2.根据权利要求1所述的高效制备虾青素标品的方法,其特征在于:所述半制备高效液相色谱仪采用的色谱柱的型号为YMC C30,柱温设置25℃。
3.根据权利要求2所述的高效制备虾青素标品的方法,其特征在于:所述半制备高效液相色谱仪中的流动相A为体积比81:15:4的甲基叔丁基醚:乙腈:水;所述半制备高效液相色谱仪中的流动相B为体积比7:90:13的甲基叔丁基醚:乙腈:水。
4.根据权利要求3所述的高效制备虾青素标品的方法,其特征在于:所述半制备高效液相色谱仪的进样流速控制为5~10mL/min,进样体积控制为1~2mL,时间程序设定为:流动相B的浓度在0~90min的时间里由0%升高至100%。
5.根据权利要求4所述的高效制备虾青素标品的方法,其特征在于:所述半制备高效液相色谱仪的检测器选用紫外检测器;紫外检测器的检测波长设定为480nm;收集时间设定为在虾青素标品出峰时间段收集样品。
6.根据权利要求5所述的高效制备虾青素标品的方法,其特征在于:所述旋转蒸发仪的旋蒸温度设定为35~45℃,转速设定为50~100rpm。
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