[发明专利]一种高效制备虾青素标品的方法

说明书

本发明公开了一种高效制备虾青素标品的方法，其整体步骤为：将发酵好的法夫酵母液离心得菌泥；向菌泥中加入二甲基亚砜溶液，水浴浸提虾青素；将水浴好的溶液离心，弃沉淀取上清液；将上清液与甲醇混合，离心后弃沉淀取上清液；将上清液通过半制备高效液相色谱仪进行提纯，得到油状的初级产物；通过旋转蒸发仪对初级产物进行提纯，最终制得虾青素标品。本发明具有操作方便、高效、重现性好、经济环保的优点，并且制备出的虾青素标品纯度高，可满足社会的需要，适用于大规模的推广应用。

技术领域

本发明涉及一种方法，尤其涉及一种高效制备虾青素标品的方法。

背景技术

虾青素的生产具有人工合成和生物获取两种方式。人工合成即为化学方法，是从胡萝卜素制得虾青素；而生物提取获取天然虾青素的方法，其生物来源一般有三种：水产品加工工业的废弃物、红法夫酵母和微藻(主要是雨生红球藻)。其中，红法夫酵母由于生产周期短、培养过程对光照条件要求较低等特点，在业内已成为生产虾青素标品的主要途径。

目前常用机械破壁、酸热破壁、酶法破壁等方法对红法夫酵母中的虾青素进行提取，但是以上方法均存在虾青素破损严重，导致产量较低的缺陷；此外，传统的提取方法大多操作复杂，并且提取效率较低，不利于规模化的生产使用。

发明内容

为了解决上述技术所存在的不足之处，本发明提供了一种高效制备虾青素标品的方法。

为了解决以上技术问题，本发明采用的技术方案是：一种高效制备虾青素标品的方法，其整体步骤为：

步骤一、将发酵好的法夫酵母液在7000～10000rpm下离心5～10min，得到菌泥；

步骤二、向菌泥中加入不少于其10倍体积的二甲基亚砜溶液，然后在40～45℃下水浴20～35min，浸提虾青素；

步骤三、将步骤二中水浴处理好的溶液于7000～12000rpm下离心5～10min，弃沉淀取上清液；

步骤四、将上清液与等体积的甲醇混合均匀，并于7000～10000rpm下离心5～10min，继续弃沉淀取上清液；

步骤五、将步骤四中得到的上清液通过半制备高效液相色谱仪进行提纯，得到油状的初级产物；

步骤六、通过旋转蒸发仪对初级产物进行提纯，最终得到的产物即为虾青素标品。

进一步地，半制备高效液相色谱仪采用的色谱柱的型号为YMC C₃₀，柱温设置25℃。

进一步地，半制备高效液相色谱仪中的流动相A为体积比81:15:4的甲基叔丁基醚：乙腈：水；所述半制备高效液相色谱仪中的流动相B为体积比7:90:13的甲基叔丁基醚：乙腈：水。

进一步地，半制备高效液相色谱仪的进样流速控制为5～10mL/min，进样体积控制为1～2mL，时间程序设定为：流动相B的浓度在0～90min的时间里由0％升高至100％。

进一步地，半制备高效液相色谱仪的检测器选用紫外检测器；紫外检测器的检测波长设定为480nm；收集时间设定为在虾青素标品出峰时间段收集样品。

进一步地，旋转蒸发仪的旋蒸温度设定为35～45℃，转速设定为50～100rpm。

本发明具有操作方便、高效、重现性好、经济环保的优点，并且制备出的虾青素标品纯度高，可满足社会的需要，适用于大规模的推广应用。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。

一种高效制备虾青素标品的方法，整体步骤为：

步骤一、将发酵好的法夫酵母液在7000～10000rpm下离心5～10min，得到菌泥；