[发明专利]一种鉴别中华鰧与日本鰧的分子标记引物及方法在审
申请号: | 201810927801.0 | 申请日: | 2018-08-15 |
公开(公告)号: | CN109182571A | 公开(公告)日: | 2019-01-11 |
发明(设计)人: | 高天翔;徐胜勇;陈治;杨天燕;王晓艳;蔡珊珊;郭文慧 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人: | 吴秉中 |
地址: | 316000 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴别 分子标记引物 扩增 测序 核苷酸序列 非特异性 鉴别结果 可重复性 扩增效率 成功性 比对 引物 表现 | ||
1.一种鉴别中华鰧与日本鰧的分子标记引物,其特征在于:所述引物序列为:
12SF:5’-GTCGGTAAAACTCGTGCCAGC-3’;
12SR:5’-CATAGTGGGGTATCTAATCCCAGTTTG-3’。
2.一种利用权利要求1所述的引物鉴别中华鰧与日本鰧的方法,其特征在于:具体步骤如下:提取中华鰧与日本鰧的DNA,以两种鱼的DNA为模板进行PCR扩增,对扩增结果进行纯化、测序,比对测序结果。
3.根据权利要求2所述的一种鉴别中华鰧与日本鰧的方法,其特征在于:所述测序结果显示中华鰧与日本鰧种内遗传差异不大于1%。
4. 根据权利要求2所述的一种鉴别中华鰧与日本鰧的方法,其特征在于:所述中华鰧的分子标记序列为SEQ ID NO.3。
5. 根据权利要求2所述的一种鉴别中华鰧与日本鰧的方法,其特征在于:所述日本鰧的分子标记序列为SEQ ID NO.4。
6. 根据权利要求2所述的一种鉴别中华鰧与日本鰧的方法,其特征在于:所述PCR扩增的反应体系组成为:超纯水17.5ul,10×buffer 2.5ul,dNTPs 2ul,rTaq 0.15ul,DNA模板1ul,Primer各1ul。
7.根据权利要求2所述的一种鉴别中华鰧与日本鰧的方法,其特征在于:所述PCR扩增程序为:94℃预变性5min,然后94℃变性45sec,50℃退火45sec,72℃延伸45sec,进行35个循环,最后72℃延伸10min,4℃保存∞。
8.含有权利要求1所述的引物的试剂盒。
9.权利要求1所述引物或权利要求8所述试剂盒在鉴别中华鰧与日本鰧中的应用。
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