[发明专利]一种茶酵母有机三价铬红茶的制作方法

权利要求书

1.一种茶酵母有机三价铬红茶的制作方法，其特征在于：依次包括三级马岭红七号菌种培养液制备步骤和含有茶酵母有机三价铬红茶加工步骤；

所述三级马岭红七号菌种培养液制备步骤依次包括以下步骤：

A、先用红茶原料泡制红茶茶汁，用烧杯取300-500ml的红茶茶汁，再往烧杯内的红茶茶汁中加入40-50g的琼脂后，加热红茶茶汁直至琼脂融化后得到混合液，用20管玻璃平口试管分别从混合液中取10-20ml的混合液形成20管培育液，将20管培育液每隔24小时放入加热至95-100℃的蒸煮器内蒸煮30-40分钟后自然冷却至常温进行一次杀菌，重复三次；

B、往20管培育液内分别装入0.08-0.15克的三氯化铬粉末后，放入温度为30-40℃的生物培养箱内培育70-80小时，得到含有茶酵母有机三价铬的20管培育液；

C、再将含有茶酵母有机三价铬的20管培育液按ML1、ML2、ML3……ML20进行编号；从每管培育液中取0.2-0.5ml的培育液作为一份培育液样品，20份培育液样品分别放入20个培养皿内，再将20个培养皿放入数控摇床振荡器上摇晃5-8小时后取出，再往20个培养皿内培育液样品中分别加入标准罗凡明B指示剂溶液，在波长为552-610nm的紫外线光下利用分区划线法观察每个培养皿内的培育液样品中菌株的数量，从20个培育液样品内选出菌株的数量最多的培养皿对编号的培养液作为马岭红一号菌种溶液；

D、取0.2-0.5ml的马岭红一号菌种溶液作为诱变样品分别放入20个培养皿内，再分别往20个培养皿内的诱变样品中加入0.015-0.035g亚硝基胍后，再将20个培养皿放入数控摇床振荡器上摇晃5-8小时后取出，再往20个培养皿内诱变样品中分别加入标准罗凡明B指示剂溶液，在波长为552-610nm的紫外线光下利用分区划线法观察每个培养皿内的诱变样品中菌株的数据，将20个培养皿内的诱变样品中菌株的数据用Cytoscape，JEPETTO–Enrichment Analysis软件包做富集分析，通过富集分析得到生物富集系数最高的菌株对应的诱变样品作为马岭红七号菌种溶液；

E、一级培养：

取50-100ml的新鲜麦芽汁放入三角瓶中，将装有新鲜麦芽汁的三角瓶放入压力为70-100kpa的高压蒸汽灭菌锅内对新鲜麦芽汁进行30-40分钟的杀菌后，取出新鲜麦芽汁自然冷却至常温；

将马岭红七号菌种溶液倒入到杀菌后的新鲜麦芽汁中，再将三角瓶放入生化培养箱内在25-28℃的恒温下培养24-48小时后，得到含有茶酵母有机三价铬的一级马岭红七号菌种培养液；

F、二级培养：

取500-600ml的新鲜麦芽汁放入三角瓶中，将装有新鲜麦芽汁的三角瓶放入压力为70-100kpa的高压蒸汽灭菌锅内对新鲜麦芽汁进行30-40分钟的杀菌后，取出新鲜麦芽汁自然冷却至常温；

将一级马岭红七号菌种培养液倒入到杀菌后的新鲜麦芽汁中，再将三角瓶放入生化培养箱内在25-28℃的恒温下培养20-24小时后，得到含有茶酵母有机三价铬的二级马岭红七号菌种培养液；

G、三级培养：

取5000-6000ml的新鲜麦芽汁放入三角瓶中，将装有新鲜麦芽汁的三角瓶放入压力为70-100kpa的高压蒸汽灭菌锅内对新鲜麦芽汁进行30-40分钟的杀菌后，取出新鲜麦芽汁自然冷却至常温；

将二级马岭红七号菌种培养液倒入到杀菌后的新鲜麦芽汁中，再将三角瓶放入生化培养箱内在25-28℃的恒温下培养36-48小时后，得到含有茶酵母有机三价铬的三级马岭红七号菌种培养液，备用；

所述茶酵母有机三价铬红茶加工步骤依次包括以下步骤：

茶叶原料选取：选一芽三叶以上的茶叶鲜叶进行采摘，得到茶叶原料；

第一次摊凉：将茶叶原料按5-10cm的厚度铺放在摊凉台上，摊凉时间为2-5小时，得到水份含量为80-90%的茶叶原料；

第一次杀青：将摊凉后的茶叶原料送入滚筒式杀青机内进行第一次杀青，得到水份含量为55-65%的茶叶原料，茶叶原料的叶色暗绿偏黄褐色且臭青气消失；

第一次揉捻：将第一次杀青后的茶叶原料放入水平揉捻机进行第一次揉捻，得到水份含量为55-65%的茶叶团；

第二次摊凉：将经第一次揉捻得到的茶叶团抖散、解块后得到成条率为75-85%的条状茶叶，条状茶叶按5-10cm的厚度均匀铺放在摊凉台上自然冷却至常温；

第二次杀青：将条状茶叶送入滚筒式杀青机内进行第二次杀青，得到水份含量为45-55%的条状茶叶；

第二次揉捻：将经第二次杀青后的条状茶叶放入水平揉捻机进行第二次揉捻，得到水份含量为45-55%的茶叶团；

第一次发酵：将经第二次揉捻得到的茶叶团抖散、解块后得到成条率为88%-91%的条状茶叶，再将条状茶叶密封在帆布袋内进行3-5小时的发酵，得到帆布发酵袋；发酵过程中每隔30分钟打开帆布袋将发酵茶叶取出，放在摊凉台上摊凉10-15分钟后，再将发酵茶叶密封在帆布袋内；

第二次发酵：将含有茶酵母有机三价铬的三级马岭红七号菌种培养液按1公斤发酵茶叶喷洒10ml三级马岭红七号菌种培养液的比例喷入帆布发酵袋内的发酵茶叶上，再将帆布发酵袋放入恒温恒湿发酵箱内继续发酵3-5小时；

第一次烘干：将第二次发酵后的茶叶送入烘干机内进行第一次烘干，得到水份含量20-30%的茶叶半成品；

第二次烘干：将第一次烘干后的茶叶半成品送入烘干机内进行第二次烘干，得到水份含量为6-8％的含有茶酵母有机三价铬红茶。