[发明专利]一种猪瘟口服弱毒冻干疫苗用冻干保护剂及应用

说明书

本发明涉及一种猪瘟口服弱毒冻干疫苗用冻干保护剂及应用，所述冻干保护剂包括质量百分含量为3%的牛血清白蛋白BSA、2%的甘露醇、2%的甘氨酸、5‑6%的乳糖，余量为水。本发明以猪瘟弱毒毒株作为种毒，通过冻干保护剂和疫苗稀释液的改进，制备得到一种免疫效果好的猪瘟口服弱毒冻干疫苗，所述疫苗能够实现猪瘟强毒病毒的完全保护，产生较高的抗体效价，实现与市售注射疫苗更好/相当的免疫效果，且方便使用。

技术领域：

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种猪瘟口服弱毒冻干疫苗用冻干保护剂及应用。

背景技术：

猪瘟（Classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（Classical swine fevervirus，CSFV）引起的猪的一种急性败血性、高度接触性传染类疾病，以出现高热、全身组织弥散性出血为其典型症状与病理特征。CSF 曾经给全世界养猪业造成重大经济损失，世界动物卫生组织将其规定为必须报告的动物传染病，我国也已将猪瘟定为一类烈性传染病，它属于危害严重、控制和扑灭的动物疫病、并且也需要采取紧急严厉、强制预防的疾病。虽然有些国家已经成功的净化了CSFV，但是全世界大多数养猪地区仍然时有发生，分布于包括亚洲、东欧、俄罗斯以及南美在内的很多国家和地区。通过扑杀与疫苗预防接种相结合的政策，猪瘟已得到有效控制。在我国，CSFV疫苗C 株（CSFV兔化弱毒苗）以及基于疫苗C 株研制的疫苗被广泛使用，近十几年来很少有猪瘟大规模暴发的情况。但零散发病时有发生，并且以非典型、温和型猪瘟和持续带毒为多见，即使是免疫猪群也会感染。

由于仔猪免疫系统不健全，CSFV对仔猪具有传染性强，致死率高等特点。随着我国养殖业的发展，仔猪的猪瘟病毒感染与流行情况出现了上升趋势。猪瘟流行地区，常采用疫苗免疫，或疫苗接种辅助扑灭，以控制本病。猪瘟疫苗按照制备方式不同可分为 3 类:灭活疫苗、弱毒疫苗及基因工程苗。灭活疫苗，以猪瘟结晶紫疫苗为代表。弱毒疫苗:根据培养方式可分为兔源及细胞源:（1）兔源：包括家兔脾淋组织苗、乳兔组织苗等，其中脾淋苗通过用兔化弱毒株(C 株)接种成年兔，收获兔体内含毒浓度高的脾脏和淋巴结制备而成的疫苗；（2）细胞源：通过细胞培养制备而成，包括乳猪肾细胞苗、绵羊肾细胞苗、猪瘟原代细胞苗(BT 细胞)、猪瘟传代细胞苗(ST 细胞)等。基因工程苗，目前仍处于研发注册阶段。与灭活疫苗相比，弱毒疫苗成本较低、免疫保护率高，是我国目前猪瘟防治主要使用的疫苗种类。我国研制的兔化弱毒疫苗，对各种猪均具有高度安全性和优良免疫原性、效果可靠，接种后1 周可产生免疫力，免疫期1 年。目前生产上主要采用两种疫苗，即猪瘟细胞活疫苗和猪瘟脾淋活疫苗，均为弱毒疫苗。还有猪三联活疫苗，可同时预防猪瘟、猪丹毒、猪肺疫。局估计，2017年以前，猪瘟疫苗以招采为主，市场规模约7.15亿元；2017年猪瘟疫苗退出政府招采后，猪瘟防疫全面向市场苗过渡。随着优质高价市场苗的普及，预计2020年行业规模将超过13亿元，整体增长接近82%。

猪瘟，其病原猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)，单股正链 RNA 病毒，为黄病毒科(Flaviridae)瘟病毒属(Pestivirus)，经研究其基因组为单股正链 RNA，约12.3kb，仅一个大的开放读码框架，由11个编码结构蛋白与非结构蛋白的基因组成。CSFV通过口腔和鼻腔黏膜进入宿主体内，在起始阶段感染扁桃体，然后随血液和淋巴循环扩散至全身。CSFV 对免疫系统细胞有独特的趋向性，能够引起感染猪只严重的白细胞减少症，这与胸腺、脾脏、淋巴窦以及骨髓内白细胞凋亡有关。